英文简称
规格
货号
P19:P19
1×106
P-X1093
产品详情：
细胞别称：P-19；P19 ；小鼠畸胎瘤细胞
种属来源：小鼠
年龄性别：雄性
组织来源：胚胎；畸胎癌
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
背景简介：P19细胞是加拿大渥太华大学的Mc Burney 等在1982 年从雄性C3H/He小鼠畸胎瘤中分离得到的 , 是一种能够在体外培养的多能干细胞，P19 细胞团经RA 诱导可分化成神经元、胶质细胞和纤维母细胞；而经二甲基亚砜(DM SO ) 诱导则分化成心肌、骨骼肌和平滑肌细胞；在P19细胞向神经元分化的过程中，神经发育相关基因的表达模式基本模拟了正常小鼠神经发育过程， 因此， P19 目前被用作一个研究神经发育的体外模型。P19细胞在含有0.1mMβ-巯基乙醇的培养基：中克隆的效率高。细胞具有多能性：在500nM维生素A酸诱导下，细胞可以分化成神经样和神经胶质样细胞；在0.5%-1.0%二甲亚砜(DMSO)存在下，细胞分化形成心脏和骨骼肌样基质，但不形成神经样或神经胶质样细胞。在DMSO和维生素A酸同时存在时，细胞的分化与只有维生素A酸一样。
生物等级：1
细胞规格：1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测：无
基因表达情况：
保藏机构：ATCC; CRL-1825 DSMZ; ACC-316 ECACC; 95102107
培养基：90%RPMI-1640+10% FBS
培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
倍增时间：~48-72小时
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：
1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜
。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
实验原理：
实验步骤：
1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。
公司正在出售的产品：
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转录调节因子HOXD9抗体 |
NDUFB11蛋白抗体 |
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HOXD9 |
转化生长因子β4抗体TGF β4 Anti-Lefty/TGF beta 4 |
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细胞分裂周期蛋白5抗体 |
GANP |
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APC5 |
中心相关核蛋白MCM3抗体 |
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丝氨酸蛋白酶8抗体 Anti-PRSS8 |
NDUFB11 |
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固生蛋白3抗体 Anti-ODZ3/Teneurin 3 |
CK3 |
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尿素转运型糖蛋白抗体 Anti-SLC14A1/RACH1 |
NSUN3蛋白抗体 |
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细胞角蛋白3抗体 |
NSUN3 |
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大鼠别孕烯醇酮/3α,5α-四氢孕酮(AP/3α,5α-THP)elisa分析检测试剂盒 |
血管内皮生长因子受体2抗体 Anti-VEGFR2/FLK1 |
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AP/3α-5α-THP ELISA Kit |
磷酸化谷氨酸受体1抗体 Anti-Phospho-NMDAR1(Ser897) |
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人敏感性脂肪酶(HSL)elisa分析检测试剂盒 |
c-Myc应答蛋白抗体 Anti-RCL/c Myc responsive |
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HSLELISAKit |
转录因子相互作用蛋白1抗体 Anti-TTI1 |
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绵羊5羟色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)elisa检测试剂盒 |
小鼠V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因源物(FOS)elisa检测试剂盒 |
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细胞CASPASE-8蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 |
P19小鼠畸胎瘤细胞高纯度质粒小提试剂盒 50次 |
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Kelch样蛋白2抗体 |
软骨中间层蛋白CILP2抗体 |
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KLHL2 |
CILP2 |
