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  • 产品名称:COLO320 DM 人结直肠腺癌细胞

  • 产品型号:P-X692
  • 产品厂商:派瑞曼
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简单介绍:
COLO320 DM 人结直肠腺癌细胞公司正在出售的产品:chang liver人宫颈癌细胞贴壁生长上皮细胞样chang liver:chang liver人细胞系组织来源:肝大鼠神经颗粒素(NG/NRGN)elisa检测试剂盒免费代测荧光核酸凝胶染色试剂Gel Green10000x 500μl
详情介绍:

细胞接收后的处理:


1)收到细胞后,75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代。

COLO320 DM 人结直肠腺癌细胞


英文简称

规格

货号

COLO320 DM :COLO320 DM

1×106

P-X692

产品详情:


细胞别称: COLO-320DM; COLO_320DM; COLO-320-DM; COLO320/DM; COLO320-DM; COLO320DM; Colo320DM; COLO320 DM; COLO 320 DM;人结直肠腺癌细胞

种属来源: 人

年龄性别: 女;55

组织来源: 器官:结肠;肿瘤分期:Dukes氏C型;:结直肠腺癌

生长特性: 半贴壁半悬浮生长

细胞形态: 圆形的并能折光的

背景简介: COLO 320DM细胞可产生5-羟色胺、去甲肾上腺素、肾上腺素、ACTH和甲状旁腺素。COLO 320DM细胞角蛋白、波形蛋白弱阳性。

生物等级: 1

细胞规格: 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测: 无

基因表达情况 serotonin; norepinephrine; epinephrine; adrenocorticotropic hormone (ACTH); parathyroid hormone

保藏机构 ATCC; CCL-220 BCRC; 60108 ECACC; 87061205;中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心

培养基: RPMI-1640+10% FBS+1%PS

培养条件: 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃

冻存条件: 无血清冻存液,液氮储存

STR鉴定位点 AmelogeninXCSF1PO11D13S31711D16S5391112D18S5115D19S43316.2D21S1133.2D2S13381825D3S135817D5S81812D7S820912D8S117913FGA20TH019TPOX89vWA1518

干冰运输及复苏好存活细胞

(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。


一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备DMEM培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二.细胞处理:

1)冻存细胞的复苏::将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 
3、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例:
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理:


公司正在出售的产品:

IWS1蛋白抗体

补体C3b抗体 Complement C3 beta chain

IWS1

磷酸化肌球蛋白轻链多肽4抗体 phospho-MYL12B (Ser20)

载脂蛋白A1结合蛋白抗体抗体

锌指蛋白257抗体 ZNF257

APOA1BP/AI-BP

小鼠抗人CD273 (B7-DC, PD-L2)单克隆抗体 human CD273 (B7-DC, PD-L2)

磷酸化肾上腺素能受体β2抗体 phospho-ADRB2 (Ser346)

成纤维细胞生长因子受体2重组兔单克隆抗体 FGFR2

CRISPR/Cas9单克隆抗体 Cas9

环磷酸鸟苷抗体 cGMP

DNAJC18蛋白抗体 DNAJC18

转录因子AP2α+β抗体 AP2 alpha + beta

核因子1B抗体 NFIB

转运蛋白SEC62抗体 SEC62

大鼠不对称二甲基精氨酸(ADMA)elisa分析检测试剂盒

神经突触相关蛋白SLITRK4抗体 SLITRK4

小鼠抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)elisa检测试剂盒免费代测

生物素标记的单体樱桃红荧光蛋白标签抗体 mCherry, Biotin conjugated

植物类黄酮测试盒

NFKB激活蛋白1抗体 MAP3K7IP3

/酵母胱硫醚-β-裂解酶(cystathionine β-lyaseCBL)活性比色法定量检测试剂盒

PECI蛋白抗体 PECI

S100B蛋白(S-100B)elisa检测试剂盒

组织砷元素比色法定量检测试剂盒

大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)elisa检测试剂盒

COLO320 DM 人结直肠腺癌细胞小鼠B-细胞趋化因子1(BLC1)elisa检测试剂盒

人脆性组氨酸三联体(FHIT)elisa分析检测试剂盒

小鼠心肌肌钙蛋白I(TNNI3)elisa检测试剂盒

细胞游离酶连续循环比色法定量检测试剂盒

大鼠抗人生长抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒

实验步骤:


1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上,利用293T细胞进行慢病毒包装,获得含目的基因的慢病毒;
2 转染前24 h进行细胞铺板,转染时细胞密度控制在80%左右;
3 天加入适量病毒悬液感染细胞,并置于37 ℃,5% CO2培养箱中孵育;
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基,并继续培养;
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养,直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%,获得稳转细胞系。
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注:1.可以使用快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!
2.如有必要,请您留下您的详细联系方式!
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