Calu-3人肺腺癌细胞上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：Calu-3人肺腺癌细胞
产品型号：P-X677
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

Calu-3人肺腺癌细胞公司正在出售的产品：CAL-27人舌鳞癌细胞贴壁生长上皮细胞样CAL-27:CAL27人细胞系组织来源：舌大鼠核连蛋白1(NUCB1)elisa检测试剂盒小鼠氢/钾离子交换ATP酶α肽(ATP4α)elisa检测试剂盒

详情介绍：

Calu-3人肺腺癌细胞

英文简称

规格

货号

Calu-3:Calu3

1×106

P-X677

产品详情：

细胞别称：CaLu-3; CALU-3; Calu 3; Calu3; CALU3；人肺腺癌细胞

种属来源：人

年龄性别：男；25岁

组织来源：肺；转移灶；胸水腺癌

生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

背景简介：Calu-3细胞是从一名25岁的白人男性肺腺癌患者的胸水中分离建系的；该患者曾使用过环磷酰胺、博来霉素、阿霉素进行。Calu-3细胞接种至裸鼠可成瘤；Calu-3细胞亦可作转染宿主。

生物等级：1

细胞规格：1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测：无

基因表达情况：Blood Type A; Rh+

保藏机构：ATCC; HTB-55 BCRJ; 0264

培养基：89%MEM+10% FBS+1%PS

培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

倍增时间：~35-45 hours

STR鉴定位点Amelogenin：X；CSF1PO：11，12；D13S317：12；D16S539：12，14；D18S51：14，17；D19S433：12，13；D21S11：28，30；D2S1338：19；D3S1358：15，18；D5S818：11；D7S820：10，11；D8S1179：11，15；FGA：25；TH01：6，9.3；TPOX：8；vWA：16，17；

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

公司正在出售的产品：

萤火虫荧光素酶抗体

白细胞酪氨酸激酶受体抗体 LTK

Luciferase

磷酸化Ras信号转导KSR1蛋白抗体 Phospho-KSR1 (Ser392)

10号染色体开放阅读框30抗体

腺苷高半胱氨酸水解酶3抗体 SAH3

C10orf30

线粒体rRNA甲基转移酶1抗体 MRM1

磷酸化丁酸盐反应因子1抗体 phospho-ZFP36L1 (Ser92)

臂板蛋白3F抗体 Semaphorin 3F

B细胞迁移基因1抗体 BTG1

核受体相互作用蛋白1抗体 NRIP1

CD79A抗体 CD79A

肿瘤抑制因子FBW7抗体 CDC4

过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α+β抗体 PGC1 alpha + beta

猪源产肠性大肠杆菌K99抗体 K99 fimbrial protein

大鼠β内啡肽(β-EP)elisa检测试剂盒

乳腺珠蛋白1抗体 Mammaglobin A

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神经管畸形相关蛋白VANGL2抗体 VANGL2

骆驼转化生长因子β2(TGFβ2)elisa分析检测试剂盒

MAWD结合蛋白抗体 PBLD

石蜡切片总高氯酸萘醌（PAN）间接染色试剂盒

NK细胞抑制性受体2DL2抗体 KIR2DL2/CD158b

鱼肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa检测试剂盒免费代测

线虫M9缓冲液

大鼠神经元正五聚蛋白Ⅰ(NPTX1)elisa检测试剂盒

Calu-3人肺腺癌细胞豚鼠生长(GH)elisa检测试剂盒

人白介素-1Rα（IL-1Rα）elisa检测试剂盒

小鼠神经生长因子(NGF)elisa分析检测试剂盒

组织PKCζ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

大鼠肌酐(Cr)elisa分析检测试剂盒

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萤火虫荧光素酶抗体	白细胞酪氨酸激酶受体抗体 LTK
Luciferase	磷酸化Ras信号转导KSR1蛋白抗体 Phospho-KSR1 (Ser392)
10号染色体开放阅读框30抗体	腺苷高半胱氨酸水解酶3抗体 SAH3
C10orf30	线粒体rRNA甲基转移酶1抗体 MRM1
磷酸化丁酸盐反应因子1抗体 phospho-ZFP36L1 (Ser92)	臂板蛋白3F抗体 Semaphorin 3F
B细胞迁移基因1抗体 BTG1	核受体相互作用蛋白1抗体 NRIP1
CD79A抗体 CD79A	肿瘤抑制因子FBW7抗体 CDC4
过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α+β抗体 PGC1 alpha + beta	猪源产肠性大肠杆菌K99抗体 K99 fimbrial protein
大鼠β内啡肽(β-EP)elisa检测试剂盒	乳腺珠蛋白1抗体 Mammaglobin A
小鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)elisa检测试剂盒	神经管畸形相关蛋白VANGL2抗体 VANGL2
骆驼转化生长因子β2(TGFβ2)elisa分析检测试剂盒	MAWD结合蛋白抗体 PBLD
石蜡切片总高氯酸萘醌（PAN）间接染色试剂盒	NK细胞抑制性受体2DL2抗体 KIR2DL2/CD158b
鱼肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa检测试剂盒免费代测	线虫M9缓冲液
大鼠神经元正五聚蛋白Ⅰ(NPTX1)elisa检测试剂盒	Calu-3人肺腺癌细胞豚鼠生长(GH)elisa检测试剂盒
人白介素-1Rα（IL-1Rα）elisa检测试剂盒	小鼠神经生长因子(NGF)elisa分析检测试剂盒
组织PKCζ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）	大鼠肌酐(Cr)elisa分析检测试剂盒

产品名称：Calu-3人肺腺癌细胞