操作步骤:
A:组织中提取
1.收集 0.1g 组织,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上用组织研磨器或匀 浆管研磨。
2.将匀浆后样品转移至 1.5ml 离心管中,11000rpm 5min,吸弃上清保留沉淀。
3.至步骤 2。
B:细胞中提取
1.收集约 10 8个细胞,3000rpm 5min(悬浮细胞直接离心,贴壁细胞使用细胞刮刀或胰蛋白酶消化离心收集 均可。注意用预冷 PBS 清洗残留培养基和胰蛋白酶等),吸弃上清。
2.至步骤 1。
步骤 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上孵育 30min(每 10min 用移液枪 吹打一次),4°C 11000rpm 离心 5min,弃上清。
步骤 2:于上述步骤离心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 涡旋一次),4°C 11000rpm 离心 5min,吸取上清于一新离心管中。
步骤 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步骤离心管中,用移液枪轻轻吹匀。
步骤 4:使用 BCA 定量试剂盒定量。
步骤 5:于步骤 3 离心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,轻轻吹匀,并应用于下游研究。
产品简介:
产品名称 |
规格 |
检测方法 |
适用样本 |
保存温度 |
货号 |
20×TBS(pH8.0,Tris缓冲盐溶液) |
500ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85584 |
自备仪器和试剂耗材:
仪器准备:
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备:
1.PBS 缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备:
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用方法:
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。本公司产品仅用于科研实验。
注意事项:
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
大鼠转化生长因于α(TGFα)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
吸引素 48T/96T ATM Attractin
补体蛋白5 48T/96T
小鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
降钙素 48T/96T
bruton酪氨酸激酶 48T/96T
20×TBS(pH8.0,Tris缓冲盐溶液)磷酸化孕受体抗体 规格: 0.1ml Anti-Phospho-Progesterone Receptor (Ser190)
球蛋白G Fc段受体I 规格: 0.2ml Anti-CD64/IGFR1
指状蛋白RET抗体 规格: 0.2ml Anti-RET/C ret
S100A13抗体 规格: 0.1ml Anti-S100A13
磷酸化SH2结构域转化蛋白1抗体 规格: 0.1ml Anti-phospho-SHC (Tyr239/240)
磷酸化信号转导分子SMAD2抗体 规格: 0.1ml Anti-Phospho-Smad2 (Ser245/250/255)
类泛素蛋白抗体 规格: 0.2ml Anti-SUMO 1
类固醇受体辅助活化因子-3 规格: 0.2ml Anti-SRC3/KAT13B/AIB1
转录因子7类似物2抗体 规格: 0.1ml Anti-TCF7L2
视黄酸受体应答蛋白3抗体 规格: 0.2ml Anti-Rarres3/TIG3
肿瘤坏死因子受体相关因子6抗体 规格: 0.2ml Anti-TRAF6
丙二酸钠培养基 250g/瓶 用于细生化鉴定现货促销
蛋白胨水培养基 250g/瓶 用于细靛基质试验特价供应
精氨酸双水解酶试验培养基 250g/瓶 用于细的精氨酸双水解酶试验现货促销
鸟氨酸脱羧酶试验培养基 250g/瓶 用于细的鸟氨酸脱羧酶试验特价供应
氨基酸脱羧酶试验对照培养基 250g/瓶 用于细的氨基酸试验对照现货促销
营养琼脂(NA) 250g/瓶 用于落总数测定、种纯化和传 代现货促销
缓冲葡萄糖蛋白胨水培养基 250g/瓶 用于细的 MR、VP 试验特价供应
平板计数琼脂(PCA) 250g/瓶 用于细总数测定特价供应
R2A 琼脂 250g/瓶 用于水中落总数测定现货促销