5×非变性蛋白上样缓冲液上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：5×非变性蛋白上样缓冲液
产品型号：BH-D85600
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

5×非变性蛋白上样缓冲液公司相关热销产品:大鼠血管紧张素Ⅰ转化酶(ACEⅠ)ELISA 试剂盒人抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA 试剂盒大鼠载脂蛋白A(apo-A)ELISA 试剂盒小鼠生长抑素(SS)ELISA 试剂盒

详情介绍：

操作步骤：

A：组织中提取

1.收集 0.1g 组织，加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂（依据实验选择），冰上用组织研磨器或匀浆管研磨。

2.将匀浆后样品转移至 1.5ml 离心管中，11000rpm 5min，吸弃上清保留沉淀。

3.至步骤 2。

B：细胞中提取

1.收集约 10 8个细胞，3000rpm 5min（悬浮细胞直接离心，贴壁细胞使用细胞刮刀或胰蛋白酶消化离心收集均可。注意用预冷 PBS 清洗残留培养基和胰蛋白酶等），吸弃上清。

2.至步骤 1。

步骤 1：加 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂（依据实验选择），冰上孵育 30min（每 10min 用移液枪吹打一次），4°C 11000rpm 离心 5min，弃上清。

步骤 2：于上述步骤离心管中加入 200μl Lysis Buffer 2，置于冰上 30min（每 10min 涡旋一次），4°C 11000rpm 离心 5min，吸取上清于一新离心管中。

步骤 3：加入 40μl Balance Buffer 于上述步骤离心管中，用移液枪轻轻吹匀。

步骤 4：使用 BCA 定量试剂盒定量。

步骤 5：于步骤 3 离心管中加入 2.4μl Adjust Buffer，轻轻吹匀，并应用于下游研究。

产品简介：

产品名称	规格	检测方法	适用样本	保存温度	货号
5×非变性蛋白上样缓冲液	5ml/ 10ml			2-8℃	BH-D85600

自备仪器和试剂耗材：

仪器准备：

1.离心机

2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备：

1.PBS 缓冲液

2.蛋白定量试剂盒
耗材准备：

1.离心管

2.吸头
3.一次性手套

使用方法：
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。本公司产品仅用于科研实验。
注意事项：
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。