Elisa试剂盒检测中样本OD值很低怎么办
*近在做ELISA实验,购买的是RD公司的ELISA试剂盒,完全按照上面的说明书步骤去做,发现做出来的标准曲线还是可以的,但是样本OD值很低,就是显色很淡,不在标准曲线范围之内,而试剂盒*低灵敏度是100PG/ML。所以我订的标准曲线*高浓度是4000PG/ML,我的样本是人血清,而购买的试剂盒说明书说应用于细胞血清的测定,用在人血清测定需要改变一些条件,但是本人摸索了一个多月,还是没能做出来。我不知道问题出在哪里,*近试着把标准品放在人血清里检测,得到的OD值也是很低0.1左右,也不再曲线范围。为什么会这样呢?我用的是1%BSA+PBS作为稀释剂,后面该用10%胎牛血清也是不行。所以问问给位同仁,我的问题出现在哪里啊,人家做ELISA,很快就完成了,可我怎么那么做不出来呢?
可根据我司给出的建议:
1. 试剂盒没有质量问题,应该从样品及保存上找原因。
2.你可以试试EDTA抗凝后取血浆检测。
3. 新鲜样品检测一下,将标准品稀释后加入血清或血浆中检测(也就是用血清进一步稀释标准品),观察检测结果,判断是否是血淸中有未知物质影响。
4. 适当延长显色时间。
5. 更换酶标仪,排除仪器原因。
6. 咨询RD的技术支持,帮助找原因。
7. 更换厂家试剂盒,重新做。