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ELISA各项实验条件的选择指南
在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:1、固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。2、包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在
发布时间:2023-11-30 10:49
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Elisa试剂盒标曲R值合格标准
Elisa试剂盒标曲R值合格标准: 实验室应按检测标准(方法)的要求使用标准溶液或标准物质建立标准曲线。所用标准溶液或标准物质应覆盖被测样品的浓度范围。检测标准(方法)如无具体的要求,至少使用5个标样(除空白外)建立线性标准曲线,每个点重复测定1-3次,对于筛选方法,线性回归方程的相关系数不应低于0.98,对于确证方法,相关系数不应低于0.99。 其实,大于0.99是判断是否为线性相关的一
发布时间:2023-11-21 14:49
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大鼠角膜上皮细胞基本特性功能
1、功能:(1)、血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。(2)、表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。(3)、与血管**的进展和稳定有关。2、生理变化:(1)、主动脉硬化。(2)、主动脉瘤(3)、主动脉钙化。3、基本特性:(1)、组织来源于正常大鼠大动脉组织。(2)、鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin**荧光染色。(3)、原代细胞培养末期液氮冻存。
发布时间:2023-11-17 14:19
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原代细胞培养与传代细胞培养区别归纳
区别一:定义不同原代细胞培养:原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的**培养,也叫初代培养。传代细胞培养:传代培养是指需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养的过程。对单层培养而言,80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段。区别二:特点不同原代细胞培养:与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大。由于培养的细胞刚刚从活体组织分离出来,故更接近于生物体内的生活状态。
发布时间:2023-11-07 11:35
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贴壁细胞的消化法传代过程
贴壁细胞的消化法传代过程:1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。2、加入1ml左右消化液(胰蛋白鳄或与EDTA混合液)轻轻接动培养瓶,使瓶底细胞都浸入溶液中.3、消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察,发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形,在还未漂起时,弃去消化液,加入培养液终止消化。4、用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液,分别接种到另外两到三个培养瓶中,置37℃培养箱中继续培养.第2天观察贴壁生长情况。5ml巨
发布时间:2023-10-30 13:45
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抗原修复方法分享
抗原修复方法:常用抗原修复液:柠檬酸缓冲液(0.01MpH6.0)、EDTA抗原修复液(pH8.0或9.0)等等。一、酶消化修复法酶消化修复切片脱蜡水化处理,TBS冲洗,在组织上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶,37℃孵育20~30min后TBS冲洗即可。二、微波抗原修复法微波盒中加入抗原修复液微波加热至沸腾,将脱蜡水化后的切片置于耐高温塑料切片架上,放入已沸腾的缓冲液中,中档或**继续微波10~15min
发布时间:2023-10-24 11:57
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PCR反应污染原因与对策
PCR反应的特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。污染原因:1、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。2、PCR试剂的污染:主要
发布时间:2023-10-18 16:33
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HGF小鼠肝细胞生长因子ELISA试剂盒试验绘制标准曲线注意点
HGF小鼠肝细胞生长因子ELISA试剂盒试验绘制标准曲线注意点:1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度
发布时间:2023-10-13 15:14
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胎牛血清综述
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、ji素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清是母牛在怀孕五至八月龄胎时,将胎牛取出并进行心脏穿刺取血。穿刺取血可zui大程度的避免外界的污
发布时间:2023-10-07 10:10
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标准物质的制备过程说明
标准物质的制备是一个关键的过程,确保其质量和可追溯性。下面是标准物质的制备过程:确定目标物质和纯度要求:确定所需的目标物质以及其纯度要求。这可能涉及从商业供应商购买纯品,从自然来源提取物质,或者通过化学合成等方式制备目标物质。基于定量分析方法:建立适当的定量分析方法,以确保目标物质的含量可以准确地测量。这通常涉及使用已知浓度的标准物质进行校准和验证。制备溶液或混合物:根据定量分析方法,准备目标物质
发布时间:2023-09-27 11:28
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选择合适的血清的方式指引
血清是细胞培养中唯yi外源添加的成分不确定的物质,血清的质量对实验成败起着关键性作用,但血清使用不当也可能会导致血清质量下降,造成细胞培养效果不理想。怎样为您的细胞选择合适的血清?目前市面上的血清产品五花八门,各种品牌宣称来自各个血源地,让人眼花缭乱。可以确定的是,除了所谓的“水货",它们当中绝大多数都是质量合格的产品。但合格不一定好用,或者说适用于某一种细胞。要确定一款血清的性能,或者从众多血清
发布时间:2023-09-19 11:19
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大鼠铁调素elisa定量检测试剂盒实验双抗体夹心法步骤
大鼠铁调素elisa定量检测试剂盒实验双抗体夹心法(检测未知抗原)步骤:1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0
发布时间:2023-09-14 10:34
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PCR引物的延伸解读
DNA模板-引物复合物在Taq DNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条与模板DNA链互补的新链。引物延伸温度的选择取决于DNA聚合酶的zui 适温度,一般为70~75℃。延伸所需要的时间取决于模板DNA的长度。一般在72℃条件下,Taq DNA聚合酶催化的合成速度大约为40~60个碱基/秒,其速度取决于缓冲溶液的组成、ph值、盐浓度与DN
发布时间:2023-09-08 11:51
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冻存原代细胞的培养
冻存原代细胞的培养:1.将一管细胞从液氮罐中取出,注意保护手和眼睛。2.将冻存管快速的放入37℃水浴中,轻轻握住并旋转,直到管内物体完全融化。3.将冻存管立即从水浴中拿出,擦干,转入无菌环境。4.用70%的酒精冲洗冻存管,然后擦去多余酒精。5.打开盖子,注意手指不要碰到里面的螺纹(注意,由于冻存管有负压,开盖时可能会有少量溢出,这是正常现象)。6.用多聚赖氨酸包被培养瓶。多数细胞推荐的接种密度为每
发布时间:2023-08-29 10:49
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缓冲溶液应用原理
由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H+离子基本上被A-离子消耗:所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。缓冲
发布时间:2023-08-23 16:36
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