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PCR反应温度循环参数
PCR反应温度循环参数:1.变性温度与时间PCR反应中模板DNA的变性十分重要。只有完全性的模板DNA和PCR产物双链完全解开,才能有效的和引物结合。这种结合是PCR扩增的基础。变性温度越高,时间越长变性就越充分。但温度过高、时间过长又会影响TaqDNA聚合酶的活性,所以通常选用变性温度为95℃30s为宜。在PCR反应中第2个循环变性重要,需时间较长,因模板DNA的链比较长。2.复性温度与时间变性
发布时间:2024-03-29 16:46
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HRP底物氯萘酚操作步骤
氯萘酚可以形成一种蓝黑色产物。敏感性低于DAB,且产物可溶于醇中。它适用于当DAB反应形成较高背景或要求改变产物的颜色。1、需要的溶液和特殊设备0.03%氯萘酚,用无水乙醇溶解(贮存在-20℃),0.05mol/LTris(pH7.6),过氧化氢,Gelvatol或者Mowiol,光学显微镜(通常带有照相机以便于记录结果)。2、操作步骤(1)氯萘酚贮存液的准备:用10mL无水乙醇溶解0.3g氯萘酚
发布时间:2024-03-21 09:59
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细胞培养过程温馨提示
细胞培养过程温馨提示:1.收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。2.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。3.用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形
发布时间:2024-03-12 10:54
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细胞划痕实验注意事项
伤口**试验,也通常称为“划痕试验”,是一种广泛建立的研究体外集体细胞迁移的技术。细胞划痕(WoundHealing)是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。其实验原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”**。划痕实验需要注意事项:1.细胞的密度;划痕实验一般是几种细胞的结合,但是每种
发布时间:2024-03-05 10:42
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PCR仪特性汇总
PCR仪是通过PCR(聚合酶链式反应)技术,对特定DNA进行扩增的仪器。PCR仪就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。PCR仪特点:1、半导体技术、新一代半导体(Peltier)技术。2、方便灵活的模块更换装置,轻松更换所需模块。3、可实现远程故障判断。
发布时间:2024-02-27 14:00
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ELISA试剂盒实验操作中的原则归纳
ELISA试剂盒恢复至室温后,取出要使用的酶标板孔,未使用的酶标板孔应及时放回铝箔袋,加入干燥剂,封紧封口,冷藏保存。切忌将未完全平衡至室温的酶标板放回铝箔袋,因为此时由于温度差,酶标板上会有水汽,不利于稳定保存。ELISA试剂盒实验操作中的原则:一、随机原则:即运用“随机数字表"实现随机化;运用“随机排列表"实现随机化;运用计算机产生“伪随机数"实现随机化。尽量运用统计学知识来设计自己的
发布时间:2024-02-19 13:59
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小鼠ELISA检测试剂盒试验产生气泡解读
通常气泡都是聚集在酶标板的孔周围,导致孔中液体不能与孔壁有效接触,使孔内反应不均一。在做实验的过程中,有时为了打干净枪头里面的液体,很容易产生气泡。 1.通常气泡都是聚集在酶标板的孔周围,导致孔中液体不能与孔壁有效接触。 2.孔内反应不均一。 3.包被时有气泡的话,将导致包被不完全实际包被量下降--弱阳性甚至假阴性。 4.封闭时有气泡的话,将导致大量未结合位点的存在,引起非特异性结合-
发布时间:2024-02-04 13:17
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对照品与标准品的区别差异
对照品与标准品是2个不同的概念,中国药典凡例中已有明确的定义:文献中常将2种概念混淆,认为对照品就是标准品,是1种物质2种提法而已,造成错误的原因,可能是有的药品既有对照品,又有标准品。例如,当用微生物法测定头孢克罗效价时,用头孢克罗标准品,用HPLC或UV法测定时,则用对照品;非那西丁当用作熔点校准物质时,用熔点标准品,测定含量时,用对照品。即使是同一种物质的标准品和对照品,它们的规格、标定
发布时间:2024-01-23 15:33
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ELISA全自动洗板机洗涤介绍
全自动洗板机洗涤的目的是将固体支持物上形成的抗原-抗体复合物与液体中其他过量的游离反应物质分离。即洗涤去除未结合的抗原和杂质,洗涤后,固相载体上仅保留特异性抗体。其他**球蛋白和血清中的杂质在洗涤过程中被洗掉,因为它们不能与固相抗原结合。因此,全自动洗板机的功能只有洗涤功能,没有检测功能。酶标仪实际上是一个比色检测器。酶标仪一般为内置洗板机式,可清洗检测,体积大。体积小只是酶标比色检测器,使
发布时间:2024-01-16 11:05
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人皮肤成纤维细胞培养小技巧
人皮肤成纤维细胞培养小技巧:1.买细胞要去靠谱的地方买,一般上面会有针对细胞的介绍,这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。2.不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第2天更换一次培养基。3.发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。**污染、**污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢
发布时间:2024-01-10 10:40
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大鼠蛋白酶原A(PGA)elisa定量检测试剂盒夹心法操作步骤
大鼠蛋白酶原A(PGA)elisa定量检测试剂盒夹心法操作步骤:实验开始前,各试剂和样本均应平衡至室温;样本复融后需再次离心,取上清检测;试剂或样本配制时,需充分混匀并尽量避免起泡;标曲和样本建议做复孔检测。1. 加样:将标准品工作液依次加入到前两列孔中,每个浓度的工作液并列加两孔,每孔100μL。待测样品加入到其他孔,每孔100μL(若样本浓度高于检测范围,需用标准品&样本稀释液稀释后取样)。给
发布时间:2024-01-02 10:41
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细胞系应用领域介绍
细胞系指原代细胞培养物经**传代成功后所繁殖的细胞群体,也指可长期连续传代的培养细胞。现在细胞系广泛的应用于科学研究和**生产,用途包括:1、科学研究:**研究开发与基础研究**研究与开发(1)新药筛选:如化学合成**药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。
发布时间:2023-12-26 10:39
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标准物质的五大类特性浅析
标准物质的五大类特性如下:1、化学成分类:标准物质,纯的化合物或是有代表性的基体样品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作农药残留分析的添加了杀虫剂的动物脂肪),以一种或多种化学或物理化学特性值表征。2、生物和临床特性类:与目录A相似的标准物质,但以一种或多种生化或临床特性值表征,如酶活性。3、物理特性类:以一种或多种物理特性值表征的标准物质,如熔点、粘性和密度。4、工程特性类:以一种或多种工程特
发布时间:2023-12-19 11:57
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硫酸酯酶2蛋白抗体实验原理
硫酸酯酶2蛋白抗体实验原理:1、特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以**病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或**的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。2、活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。3、结合细胞:不同类别的**球蛋白,可结合不
发布时间:2023-12-13 11:02
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RT-qPCR原理主要步骤
RT-qPCR原理的三个主要步骤:1、反转录:1)、使用逆转录酶和特定引物将RNA样品反转录成cDNA。2)、该步骤将RNA模板转化为更稳定且可扩增的DNA形式。3)、反转录过程中使用特定引物。2PCR扩增:1)、使用特定引物对cDNA进行PCR扩增,这些引物环绕目标区域。2)、PCR是一个循环过程,呈指数级扩增DNA模板的数量。3)、PCR反应中包含荧光染料或探针,它们结合到扩增的DNA序列上并
发布时间:2023-12-05 10:56
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