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贴壁细胞与悬浮细胞传代
操作步骤:1、贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量
发布时间:2023-10-09 14:22
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AD人Adropin蛋白ELISA试剂盒实验操作注意事项
AD人Adropin蛋白ELISA试剂盒实验操作注意事项:1、加样:①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。2、温育:①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;③96孔板周围孔与
发布时间:2023-10-03 10:52
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标准物质的五大类特性
标准物质的五大类特性:1、化学成分类:标准物质,纯的化合物或是有代表性的基体样品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作农药残留分析的添加了杀虫剂的动物脂肪),以一种或多种化学或物理化学特性值表征。2、生物和临床特性类:与目录A相似的标准物质,但以一种或多种生化或临床特性值表征,如酶活性。3、物理特性类:以一种或多种物理特性值表征的标准物质,如熔点、粘性和密度。4、工程特性类:以一种或多种工程特性值
发布时间:2023-09-26 09:48
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ELISA试剂盒检测结果分析方法
ELISA试剂盒检测结果分析方法:1、ELISA实验中样品都要做复孔或三孔,然后计算每个浓度标准品的平均OD值,复孔的变异系数应该小于20%。2、平均OD值减去空白孔的OD值。3、制作标准曲线。 以减去本底后的OD值为X轴,标准品的浓度为Y轴,利用作图软件得出一个合适的计算方法。建议使用合适的软件来作图,比如CurveExpert1.4。这款软件能够给出很多种方法(比如直线、半对数、对数、四参
发布时间:2023-09-18 16:22
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影响培养基灭jun 效果的因素
影响培养基灭jun效果的因素:1、微生物种类:不同的微生物k值不同。2、初始菌量:在保持N值不变的前提下,t与初始菌量N0的对数成正比。3、培养基成份:油脂、蛋白质增加微生物的耐热性。4、传热与混合状况:影响受热均匀度。5、培养基中固体颗粒的存在影响热穿透。6、蒸汽中空气的存在降低蒸汽分压和灭jun温度。7、pH:酸性pH下可加快微生物热死速率
发布时间:2023-09-11 11:13
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LAMP试剂盒PCR反应的特异性决定因素
PCR反应的特异性决定因素为:①引物与模板DNA特异正确的结合;②碱基配对原则;③TaqDNA聚合酶合成反应的忠实性;④靶基因的特异性与保守性。其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及TaqDNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。
发布时间:2023-08-30 10:27
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大鼠ELISA试剂盒实验操作步骤要点
大鼠ELISA试剂盒实验操作步骤要点:1.加样:①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。2.温育:①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力
发布时间:2023-08-22 15:02
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ELISA包被条件选择指南
1.包被抗原的选择包被抗原可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类。天然蛋白需经纯化才能用直接吸附法包被,对于含杂质较多的抗原可以采用间接捕获法包被(先用能够与目的抗原反应的物质如抗体直接吸附在酶标板上,再通过特异性反应使抗原固相化)。经纯化的重组蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有机化合物,由于分子量太小,往往难于直接吸附在酶标板上,一般都先使其与无关蛋白质如BSA等偶联,
发布时间:2023-08-14 13:05
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细胞培养操作规程
细胞培养操作规程:一.培养基及培养冻存条件准备:1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优zhi胎牛血清,10%。2、培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。3、冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。二.细胞处理:1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴
发布时间:2023-08-07 10:35
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选择合适一抗要点
选择合适一抗要点:1、确定抗体的名字,注意中英文名字、它名、亚型等信息。2、确定你的实验类型,Elisa,WB,IHC,ICC,还是FACS。一般抗体的说明书都会列出该抗体经验证过适用于何种实验的类型,如果抗体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种实验验证,请根据说明书列出的已验证的类型来选择适合你实验的抗体。3、确定实验样本的种属,Human,
发布时间:2023-08-01 10:37
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辨别胎牛血清的质量外观细节
胎牛血清(FetalBovineSerum)是在母牛怀孕5-8个月时,通过胎牛心脏穿刺采血获取的血清。牛血清作为实验室广泛推崇的天然培养被应用于细胞培养。胎牛血清含有胚胎发育所必需的生长因子。 胎牛血清因富含丰富的营养还有细胞**必须的成分所以大多时候用来培养干细胞等一些珍贵难养的细胞,某些细胞必需胎牛血清才能生长,胎牛血清的珍贵导致它的价格也比其他的新生牛血清、小牛血清贵的多。所以学会如何辨别
发布时间:2023-07-24 14:54
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ELISA实验各项条件选择
在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:1、固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。2、包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在
发布时间:2023-07-19 11:20
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小鼠冠状动脉内皮细胞操作要点
小鼠冠状动脉内皮细胞操作要点:1、将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。2、将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝
发布时间:2023-07-11 10:35
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发布时间:2023-07-05 13:00
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ELISA包被的方式
将抗原或抗体固定在过程称为包被(coating)。换言之,包被即是抗原或抗体结合到固相载体表面的过程。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用力。这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响。载体对不同蛋白质的吸附能力是不相同的,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。
发布时间:2023-06-28 10:14
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