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ELISA包被的方式
将抗原或抗体固定在过程称为包被(coating)。换言之,包被即是抗原或抗体结合到固相载体表面的过程。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用力。这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响。载体对不同蛋白质的吸附能力是不相同的,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。
发布时间:2023-06-28 10:14
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大鼠ELISA试剂盒特点优势
大鼠ELISA试剂盒特点优势: 1.试剂应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、an全性及经济性quan面评价。 2.灵敏度:有二层含义,1)为试剂检出被检物质的低量的能力;2)为试剂对大量样品中阳性检出的能力。3.特异性:常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应,使测定结果升高,可能导致假阳性,所以交叉反应是评价其质量的关键指标。4.精密度:ELISA试剂一般指其批
发布时间:2023-06-14 10:44
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ELISA样本细胞提取液反复冻融方法
ELISA样本细胞提取液反复冻融方法:1、吸出培养板中的培养基,用胰蛋白酶消化细胞,然后加入适量的培养基将培养板上的细胞冲洗干净。悬浮细胞可以省略该步骤。2、将细胞悬浮液收集到离心管中,在2-8℃下以1000×g离心5分钟,然后吸去培养基,用预冷PBS洗涤细胞3次。3、加入适量的预冷PBS(建议在使用前立即加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。在6孔培养板(约1×106个细胞)中,每个孔加入150-250μ
发布时间:2023-06-06 10:41
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ELISA 操作过程注意事项
ELISA操作过程注意事项:1、操作前应对实验的物理参数有充分的了解,如环境温度(保持在18C~25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等,要先查看水育箱温度,是否符合要求。2、正确使用加样器加样器应垂直加入标本或试剂,避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅,血清残留在反应孔壁上,加样器吸头要清洗干净,避免污染,加样次序要与说明书一致,否则可导致结果错误,实验重复性差。3、手工洗板加洗液时
发布时间:2023-05-29 11:19
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细胞培养血清中的主要作用事项
血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。在细胞培养中的主要作用事项如下:1.提供对维持细胞指数生长的ji素,特别是基础培养基中没有或量很少的营养物,还包括一些主要的低分子营养物;2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他ji素等,能结合或调变它们所结合的物质活力;3.血清中含有一些微量元素,有些情况下结合蛋白质能与有毒金属
发布时间:2023-05-24 11:12
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PCR引物纯度和稳定性
定制引物的标准纯度对于大多数PCR应用是足够的。因脱盐而除去的苯甲酰基和异丁酰基很少,因此不会干扰PCR。部分应用需要纯化,以除去在合成过程中的任何非全长序列。这些截断序列的产生是因为DNA合成化学的效率不是100%。这是个循环过程,在每个碱基加入时使用重复化学反应,使DNA从3'到5'合成。在任何一个循环都可能失败。较长的引物,尤其是大于50个碱基,截断序列的比例很大,可能需要纯化。 引物产量
发布时间:2023-05-16 11:48
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抗原抗体反应的主要四个特性
抗原抗体反应的特点主要有四性:即特异性、比例性、可逆性,阶段性。特异性:是抗原抗体反应的zui主要特征,这种特异性是由抗原决定簇和抗体分子的超变区之间空间结构的互补性确定的。这种高度的特异性在传染病的诊断与防治方面得到有效的应用。随着免yi学技术的发展进步,还将在医学和生物学领域得到更加深入和广泛的应用,比如肿瘤的诊断和特异性zhi疗等。比例性:是指抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系,只有
发布时间:2023-05-10 13:20
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化学试剂储存应防变质事项
化学试剂储存应防变质事项:1.防氧化:亚硫酸钠、硫酸亚铁、硫代硫酸钠均易被氧化,瓶口应涂腊。2.防碳酸化:硅酸钠、过氧化钠、苛性碱均易吸收二氧化碳,应该涂腊。3.防风化:晶体碳酸钠、晶体硫酸铜应进行腊封,存放在地下室中。4.防分解:碳酸氢铵、浓硝酸受热易分解,涂腊后,存放在地下室中。5.活性炭能吸附多种气体而变质,(木炭亦同),应放在干燥器中。6.黄磷遇空气易自燃,永远保存水中,每15天查水一次:
发布时间:2023-05-05 13:33
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动物植物细胞培养所需条件
1、动物细胞培养在所有的细胞离体培养中,zui困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。⑴血清:动物细胞离体培养常常需要血清。常见的是小牛血清。血清提供生长必需因子,如激su、微量元素、矿物质和脂肪。在这里,血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。⑵支持物:大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用玻璃,塑料等作为支持物。⑶气体交换:二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节,不断
发布时间:2023-04-24 10:45
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ELISA三种结果判定方法
1.定性测定(1)ELISA试剂盒阳性判定值法(cut-offvalue,CO值):一般为阴性对照的平均A值加一个常数,试剂制备严格标准化,要先计算出阳性对照A值平均数和阴性对照A值平均数。标本A值≥CO值即为阳性。(2)抑制率法:在竞争抑制法中结果可用抑制率表示。抑制率(%)=(A阴性对照A-A待测)/阴性对照X100%,一般以抑制率≥50%为阳性试剂盒。2.半定量测定 结果一般以滴度表示。将标
发布时间:2023-04-21 15:17
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抗体的作用机理简述
抗体是一种被免yi系统用来鉴别与中和外来物质如xi菌、病毒等的大型Y形蛋白质,是一种免yi球蛋白。它的产生是由于抗原侵入人体后引起各种免yi细胞相互作用,使淋ba细胞中的B细胞增殖分化而形成浆细胞(效应B细胞),浆细胞可产生分泌抗体。抗体的分类:按作用对象,可将其分为抗毒su、抗jun抗体、抗病毒抗体和亲细胞抗体。抗体的作用机理:1、抗体在抗原颗粒和吞噬细胞之间“搭桥”,从而加强了吞噬细胞的吞噬
发布时间:2023-04-11 13:44
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ELISA试剂盒一般使用规则
ELISA试剂盒检测过程中通用规则如下:1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但zui好有专业人员进行矫正。2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。4、实验时,要使底物避光保存。5、用枪吸取液体时速度不能太快
发布时间:2023-03-21 11:54
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生化试剂操作步骤
生化试剂操作步骤:1.整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物an全柜,样本处理在生物an全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀jun装置。2.为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶
发布时间:2023-03-14 11:56
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大鼠ELISA试剂盒血清解冻注意事项
大鼠ELISA试剂盒血清解冻注意事项:1、请勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。2、按照所建议的逐步解冻法(-2O℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。3、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。4、随时将之摇晃均匀,使温度及成
发布时间:2023-03-10 10:39
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ELISA试剂盒标准曲线绘制注意点
绘制ELISA试剂盒标准曲线需要注意点:1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度zui陡段,即曲线几乎成
发布时间:2023-02-28 10:46
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