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荧光定量PCR实验操作步骤
荧光定量PCR实验操作步骤：1、取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。2、两相分离每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZO
发布时间：2022-11-01 16:42
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总结血清的几个主要作用
总结血清的几个主要作用：1、提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。2、提供ji素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质ji 素（氢化可的松、地塞米松）、类固醇ji 素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。
发布时间：2022-10-25 10:38
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PCR反应出现非特异性扩增原因及对策
PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致，或大或小，或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带。1、引物与靶序列不完全互补或引物聚合形成二聚体。2、Mg2+离子浓度过高。3、退火温度过低。4、PCR循环次数过多有关。5、酶的质和量，往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现，酶量过多有时也会出现非特异性扩增。其对策有：必要时重新设计引物。减低酶量或调换另一来源的酶。降低引物量，适当增加模
发布时间：2022-10-19 10:29
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转基因植物PCR检测试剂盒实验步骤
转基因植物PCR检测试剂盒实验步骤：1.产品仅用于科研取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。2.两相分离每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是
发布时间：2022-10-08 13:59
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细胞株主要作用
细胞株主要作用通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株（CellStrain）。基本信息细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经**传代成功后即为细胞系(cellline)，由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限，细胞株可称为有
发布时间：2022-09-29 08:54
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影响PCR特异性的因素分析
有许多因素可以影响PCR的特异性，在此我们作一归纳，供大家参考：1、退火步骤的严格性：提高退火温度可以减少不匹配的杂交，从而提高特异性。2、减短退火时间及延伸时间可以减少错误引发及错误延伸。3、引物二聚体是常见的副产品，降低引物及酶的浓度也可以减少错误引发，尤其是引物的二聚化。4、改变MgCl2(有时KCl)浓度可以改进特异性，这可能是提高反应严格性或者对Taq酶的直接作用。5、模板中如果存在次级
发布时间：2022-09-26 16:08
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钙粘附蛋白-11抗体的制备过程
钙粘附蛋白-11抗体的制备过程：1.免yi原的制备普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免yi原。小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免yi原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。2.免yi动物常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。3.免yi
发布时间：2022-09-21 10:53
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有关细胞培养
细胞培养方法：1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4
发布时间：2022-09-13 16:25
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微生物接种、分离及培养
微生物接种、分离及培养： 1、微生物接种：指将微生物纯种或含菌材料转移到另一营养基质上的过程。根据不同的目的可以采用不同的接种方法，如平板划线法，涂布法，倾注法等。2、微生物分离：指依据微生物的特征，采用各种方法从含菌样品中获得由单一个体（如单一菌体或孢子）或一段菌丝生长繁殖形成的微生物群体的过程。常用的分离方法有平板划线法，稀释涂布法，平板分离法，稀释倾注平板分离法和单细胞分离法。平板分离法的基
发布时间：2022-09-06 11:32
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选择ELISA试剂盒参考要素
选择ELISA试剂盒参考要素：1、特异性：ELISA试剂盒的特异性于试剂盒的关键组分，抗体对有关，若抗体对中之一为多抗，另一个必须为单抗，建议使用双单抗。2、灵敏度：灵敏度反映的是试剂盒检出被检物质的低量的能力，用户可根据自己样本中待检指标的量选择合适的试剂盒，如果待检指标量很低，一般的试剂盒不能满足要求，可选择高敏的ELISA试剂盒。3、重复性：科学实验讲求重复性，一般ELISA试剂盒，期板内和
发布时间：2022-08-29 14:16
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荧光化学物质原理介绍
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种：荧光探针和荧光染料。现将其原理介绍如下：1.TaqMan荧光探针：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'－3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可
发布时间：2022-08-22 16:43
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详述血清和血浆的区别
血清和血浆的区别在于是不是含有纤维蛋白原，这是主要的区别。离开血管的全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，所获得的不含细胞成分的液体，即血浆。而离体的血液凝固之后，经血凝块聚缩释出的液体，即血清。粗略的说，血清与血浆的区别，主要在于血清不含纤维蛋白原，纤维蛋白原能转换成纤维蛋白，具有凝血作用在临床应用中，血浆一般是大面积shao伤的病人使用，而血清可以用来检验血型。具体区别：血清：血液凝固析出的淡黄色透
发布时间：2022-08-15 15:45
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ELISA实验细胞提取液样本反复冻融方法
ELISA实验细胞提取液样本反复冻融方法:1、吸出培养板中的培养基，用胰蛋白酶消化细胞，然后加入适量的培养基将培养板上的细胞冲洗干净。悬浮细胞可以省略该步骤。2、将细胞悬浮液收集到离心管中，在2-8℃下以1000×g离心5分钟，然后吸去培养基，用预冷PBS洗涤细胞3次。3、加入适量的预冷PBS（建议在使用前立即加入蛋白酶抑制剂）重悬细胞。在6孔培养板（约1×106个细胞）中，每个孔加入150-25
发布时间：2022-08-02 09:54
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xi 胞培养技巧
xi胞培养技巧:1.买细胞要去靠谱的地方买，比如ATCC或者素冉生物。一般上面会有针对细胞的介绍，这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。2.不管是买的细胞，还是别人惠赠的细胞，刚拿到手赶紧的做两件事：检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存，冻存细胞复苏后第2天*更换一次培养基。3.发现细胞有污染迅速处理掉，特别是当你养了很多种细胞时。xi菌污染、真jun污染很容易发现，支原体
发布时间：2022-07-26 11:55
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拜氏不动杆菌的培养条件及菌株特点的描述
拜氏不动杆菌的培养条件： 1、营养肉汁琼脂：牛肉膏3.0g，蛋白胨10.0g，NaCl5.0g，琼脂15.0g，蒸馏水1.0L，pH7.0。[注]培养芽孢杆菌时加入5mgMnSO4·H2O，则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃，15min。 2、需氧类型：好氧 3、培养温度：55℃拜氏不动杆菌菌株特点： 1、该菌为需氧芽孢杆菌，**繁殖体G兰氏染色阴性呈紫色，**芽胞孔雀绿着色。其**繁
发布时间：2022-07-15 11:34
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