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细胞分离与培养
细胞分离与培养:1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;2、往组织块中加入4mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10%FBS培养基终止消化后4℃放置;3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10m
发布时间:2022-06-08 10:34
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ELISA试剂盒保存条件
ELISA试剂盒保存条件elisa试剂盒属固相免yi测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有*贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA检测试剂盒反应总是需要一定时间的温育。温育常采用的温度
发布时间:2022-05-31 14:53
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PCR引物设计的一般原则是什么?
PCR引物设计的一般原则是什么?1、引物长度:15-30bp,一般为20bp左右。2、引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。上下游引物的GC含量不能相差太大。A/T/C/G*好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。3、引物结构:避免引物3’端出现互补序列及二级结构,3’端的碱基特别是*末及倒数第2个碱基,应严格要求配对。4、引物中
发布时间:2022-05-23 13:55
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检测蛋白时ELISA试剂盒的选择步骤
ELISA试剂盒的选择有许多考虑的因素,比如说实验目的、价格、操作方法等因素。比如检测蛋白,基本有下列步骤:第1步,明白检测何种蛋白;第2步,明确编码该蛋白的基因与其他哪些物种同源性*好;第3步,寻找检测这些物种蛋白的试剂盒;第4步,咨询商家ELISA试剂盒使用的抗体类型:单抗还是多抗?单抗是针对什么抗原决定簇的;第5步,做出自己的判断,该买哪个试剂盒;此外,选择试剂盒的时候,还应考虑样本类型、样
发布时间:2022-05-18 11:15
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分光光度法原理概述
分光光度法原理概述选择吸收分光光度法物质与光作用,具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生的。即有色溶液所呈现的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收所致。由于不同的物质其分子结构不同,对不同波长光的吸收能力也不同,因此具有特征结构的结构集团,存在选择吸收特性的*大实收波长,形成*大吸收峰,而产生特有的吸收光谱。即使是相同的物质由于其含量不同,对光的吸收程度也不同。利用物质所特有的吸
发布时间:2022-05-11 16:11
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解析Elisa试剂盒灵敏度
Elisa试剂盒灵敏度高能使产品达到一定的数值,对产品试验有着非常大利益,它能检测到的分析物的*小量,表示检测下限的能力。相对灵敏度=真阳性/(真阳性+假阴性)×100%测定方法及表示方法:灵敏度标准品、质控血清、阳性标本稀释终点、血清盘(pannel)及临床标本阳性率。灵敏度标准品可以从卫生部临检中心购买,质控血清可以从卫生部临检中心购买,也可以自己配制。因为质控血清不一定是原倍血清,或由于片段
发布时间:2022-05-10 11:46
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细胞株基本介绍
细胞株基本介绍通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株(CellStrain)。基本信息细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经**传代成功后即为细胞系(cellline),由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限,细胞株可称为有
发布时间:2022-05-05 15:38
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枯草芽孢杆菌注意事项
注意事项:1. 取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2. 冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO)对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作 较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口
发布时间:2022-05-05 15:27
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综述血清的作用
血清,性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。血清指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。今天我们就一起来看看血清的作用分析。1、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到**作用。2、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。3、提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他**等,能结合或调变它们所结合的物质活力。4、起酸碱度缓冲
发布时间:2022-04-24 14:26
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ELISA试剂盒测定错误的主要要素
ELISA试剂盒测定错误的主要要素有三大:标本要素;试剂要素;操作要素。ELISA试剂盒的基本原理使抗原(或抗体)结合到某种固相载体外表,并坚持其免yi活性;使抗原(或抗体)与某种酶联结成酶标抗原(或抗体),并且此酶标抗原(或抗体)既保存其免yi活性,又保存其酶活性;测守时将受检标本(抗体或抗原)和酶标抗原(或抗体)按不同进程与固相载体外表的抗原或抗体进行反响。再用洗刷办法使固相载体上构成的抗原抗
发布时间:2022-04-19 14:46
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标准品与对照品的区别
标准品,即是标准物品,作为一种衡量标准,如果用在药wu方面,则为含量测定中的标准含量。标准品包括化学计量标准品、冶金标准品和药检标准品。采用生化方法来测定,目前国家规定的标准品共有15种,林可酶素、新霉素、大观酶素、太乐菌素、链霉素、卡那霉素、绒促性素、盐酶素、杆菌肽锌、吉他酶素、安普酶素、红霉素、合成缩宫素、庆大霉素、渡毛化苷G。对照品,是指用于鉴别、检查、含量测定和校正检定仪器性能的标准物质。
发布时间:2022-04-13 15:21
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了解大肠杆菌表达系统的组成
大肠杆菌表达系统的组成:表达载体、外源基因、表达宿主菌。一、表达载体:一个完整的质粒载体需要有:复制起点、启动子、插入的目的基因、筛选标记以及终止子。二、外源基因:在大肠杆菌表达体系中要表达的基因即外源基因,包括原核基因和真核基因。原核基因可以在大肠杆菌中直接表达,但是真核基因含有内含子,大肠杆菌不能对mRNA进行剪切,从而真核基因一般以cDNA的形式在大肠杆菌表达系统中表达。目的蛋白在大肠杆菌系
发布时间:2022-04-07 16:10
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猪苓多孔菌的组成
猪苓多孔菌的组成猪苓多孔菌(学名:Polyporusumbellatus(Pers.)Fr.)是多孔菌科、多孔菌属多年生**。埋生于地下,呈现不规则块状,菌核表面有白色、灰色和黑色,菌核分为表皮和髓质,髓质由菌丝黏连交织而成,菌核表皮细胞趋于木质化,子实体由生殖菌丝、骨架菌丝和联络菌丝组成,菌盖白色圆形,中部脐状,有淡黄色的纤维层鳞片状,呈放射状,触摸有软毛绒感觉。子实体的大小与隐生在地下的菌核大
发布时间:2022-03-31 16:47
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抗体的功能作用
抗体的功能作用:1、特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清chu病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒su的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。2、激活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。3、结合细胞:不同类别的免yi球蛋白,可结合不同
发布时间:2022-03-30 16:46
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人胚胎肾细胞转化细胞原代培养过程
人胚胎肾细胞转化细胞原代培养过程:1.取出小鼠后沥干酒精,放入超净台内,固定在泡沫板上。2.用镊子提起皮肤,用解剖剪剪开皮肤一个横切口,将皮肤向上撕开,然后剪开肌肉等,暴露出腹腔,在左侧找到脾脏,用弯头眼科镊取出脾脏,置于无菌培养皿中。3.用生理盐水将取出的脾脏清洗多次,并剔除多余无用的组织。4.将筛网置于平皿中,脾脏置于筛网上,用弯头镊镊住,轻轻在筛网上进行碾磨,同时不停滴加不含血清的培养液冲洗
发布时间:2022-03-23 13:22
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