-
有关细胞培养
细胞培养方法:1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4
发布时间:2022-09-13 16:25
点击次数:200 次
-
微生物接种、分离及培养
微生物接种、分离及培养: 1、微生物接种:指将微生物纯种或含菌材料转移到另一营养基质上的过程。根据不同的目的可以采用不同的接种方法,如平板划线法,涂布法,倾注法等。2、微生物分离:指依据微生物的特征,采用各种方法从含菌样品中获得由单一个体(如单一菌体或孢子)或一段菌丝生长繁殖形成的微生物群体的过程。常用的分离方法有平板划线法,稀释涂布法,平板分离法,稀释倾注平板分离法和单细胞分离法。平板分离法的基
发布时间:2022-09-06 11:32
点击次数:167 次
-
选择ELISA试剂盒参考要素
选择ELISA试剂盒参考要素:1、特异性:ELISA试剂盒的特异性于试剂盒的关键组分,抗体对有关,若抗体对中之一为多抗,另一个必须为单抗,建议使用双单抗。2、灵敏度:灵敏度反映的是试剂盒检出被检物质的低量的能力,用户可根据自己样本中待检指标的量选择合适的试剂盒,如果待检指标量很低,一般的试剂盒不能满足要求,可选择高敏的ELISA试剂盒。3、重复性:科学实验讲求重复性,一般ELISA试剂盒,期板内和
发布时间:2022-08-29 14:16
点击次数:184 次
-
荧光化学物质原理介绍
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种:荧光探针和荧光染料。现将其原理介绍如下:1.TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可
发布时间:2022-08-22 16:43
点击次数:484 次
-
详述血清和血浆的区别
血清和血浆的区别在于是不是含有纤维蛋白原,这是主要的区别。离开血管的全血经抗凝处理后,通过离心沉淀,所获得的不含细胞成分的液体,即血浆。而离体的血液凝固之后,经血凝块聚缩释出的液体,即血清。粗略的说,血清与血浆的区别,主要在于血清不含纤维蛋白原,纤维蛋白原能转换成纤维蛋白,具有凝血作用在临床应用中,血浆一般是大面积shao伤的病人使用,而血清可以用来检验血型。具体区别:血清:血液凝固析出的淡黄色透
发布时间:2022-08-15 15:45
点击次数:175 次
-
ELISA实验细胞提取液样本反复冻融方法
ELISA实验细胞提取液样本反复冻融方法:1、吸出培养板中的培养基,用胰蛋白酶消化细胞,然后加入适量的培养基将培养板上的细胞冲洗干净。悬浮细胞可以省略该步骤。2、将细胞悬浮液收集到离心管中,在2-8℃下以1000×g离心5分钟,然后吸去培养基,用预冷PBS洗涤细胞3次。3、加入适量的预冷PBS(建议在使用前立即加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。在6孔培养板(约1×106个细胞)中,每个孔加入150-25
发布时间:2022-08-02 09:54
点击次数:599 次
-
xi 胞培养技巧
xi胞培养技巧:1.买细胞要去靠谱的地方买,比如ATCC或者素冉生物。一般上面会有针对细胞的介绍,这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。2.不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第2天*更换一次培养基。3.发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。xi菌污染、真jun污染很容易发现,支原体
发布时间:2022-07-26 11:55
点击次数:184 次
-
拜氏不动杆菌的培养条件及菌株特点的描述
拜氏不动杆菌的培养条件: 1、营养肉汁琼脂:牛肉膏3.0g,蛋白胨10.0g,NaCl5.0g,琼脂15.0g,蒸馏水1.0L,pH7.0。[注]培养芽孢杆菌时加入5mgMnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃,15min。 2、需氧类型:好氧 3、培养温度:55℃拜氏不动杆菌菌株特点: 1、该菌为需氧芽孢杆菌,**繁殖体G兰氏染色阴性呈紫色,**芽胞孔雀绿着色。其**繁
发布时间:2022-07-15 11:34
点击次数:524 次
-
实时荧光定量PCR的十大不利操作说明
实时荧光定量PCR的十大不利操作说明1、引物和探针设计不当为了*高效地设计用于实时荧光定量PCR的引物和探针,我们强烈建议您使用引物设计软件。大多数引物设计程序均包含了可调节的参数以设计*佳的引物和探针。这些参数涉及了引物/探针的Tm值、互补性、二级结构以及扩增子大小等重要因素。另外还建议您限制连续的重复核酸数目。当设计用于真核目标序列的扩增子时,请选择在目标mRNA中至少跨越一个外显子-外显子接
发布时间:2022-07-06 11:43
点击次数:415 次
-
PCR反应被污染种类
PCR反应的*大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。PCR反应被污染种类:一、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。二、PCR试剂
发布时间:2022-07-01 13:06
点击次数:153 次
-
PCR产物量过少处理办法
PCR产物量过少处理办法:1、退火温度不合适。以2度为梯度设计梯度PCR反应优化退火温度。2、DNA模板量太少。增加DNA模板量。3、PCR循环数不足。增加反应循环数。4、引物量不足。增加体系中引物含量。5、延伸时间太短。以1kb/min的原则设置延伸时间。6、变性时间过长。变性时间过长会导致DNA聚合酶失活。DNA模板中存在抑制剂。确保DNA模板干净。
发布时间:2022-06-28 16:17
点击次数:1687 次
-
体外细胞培养操作要点
细胞培养是生物医学研究人员必须掌握的一项基本技能,是实验成功与否的关键。所以,了解细胞培养的基本操作要领,对生物医药科研工作者,特别是对基础研究工作者来说,显得尤为重要。文章从实际操作的角度谈谈体外细胞培养操作要点。一、试验前的准备一般细胞生长环境为5%的二氧化碳,37℃恒温及饱和湿度。在细胞培养开始之前,实验人员必须查阅资料,了解细胞培养的习惯,如贴壁、半贴壁、悬浮物等。理解细胞生长的营养条件,
发布时间:2022-06-21 16:06
点击次数:497 次
-
成团泛菌形态特征
成团泛菌形态特征成团泛菌,细胞呈直杆状,0.5-1.0×1-3um,革兰氏阴性**,以周生鞭毛运动,能产生黄色素。形态特征细胞呈直杆状,0.5-1.0×1-3um,革兰氏阴性**,以周生鞭毛运动,能产生黄色素。兼性厌氧,是具有代谢和发酵类型的化能异养菌。*适温度30℃。发酵D-葡萄糖和其它糖类可产酸,但不产气。氧化酶阴性,接触酶阳性,吲哚阴性,M-R可变。苯丙氨酸脱氨酶阳性,赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶以
发布时间:2022-06-17 15:33
点击次数:218 次
-
生化试剂技术分析
生化试剂的技术分类:1.生化分离与分析技术光谱技术已从单一的比色法发展为采用分光光度法、透射比浊法、原子吸收和火焰发射光谱法、分子荧光光谱法。分离技术除了一般的离心和超离心技术外,还有层析技术和电泳技术。层析技术包括薄层层析、凝胶层析、离心交换层析、亲和层析、气相层析、高效液相色谱(HPLC)等等。电泳技术中纸电泳、醋酸纤维膜电泳的应用已明显减少,琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAG)应用增多,
发布时间:2022-06-15 14:04
点击次数:136 次
-
细胞分离与培养
细胞分离与培养:1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;2、往组织块中加入4mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10%FBS培养基终止消化后4℃放置;3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10m
发布时间:2022-06-08 10:34
点击次数:213 次