腺苷干预人结直肠癌SW480细胞RECK基因甲基化及其机制
李权 重庆医科大学 摘要：目的：探讨腺苷干预人结直肠癌SW480细胞RECK基因甲基化及其机制。方法：分别用0,3.0 mmol/L的腺苷干预SW480细胞72 h后,亚硫酸氢盐测序法(BSP)检测RECK基因启动子区CpG岛甲基化情况；逆转录PCR、Western印迹法、流式细胞仪检测腺苷处理前后RECK基因mRNA和蛋白的表达情况、甲基转移酶(Methyltransferases DNMT1, DNMT3a)蛋白表达情况及细胞凋亡的变化。结果：(1)腺苷干预后RECK基因甲基化程度为49.14%±2.38%,明显低于对照组(74.84%±2.38%,均P<0.01)；腺苷干预后RECK基因mRNA转录及蛋白表达水平、细胞凋亡水平均明显高于对照组(0.3353±0.3502比0.0800±0.0036,0.6030±0.0178比0.0900±0.0030,27.90%±2.32%比5.09%±0.30%,均P<0.01)；甲基转移酶(DNMT1, DNMT3a)蛋白表达情况均明显低于对照组(0.1413±0.0021比0.6450±0.0092,0.1300±0.0046 比 0.5267±0.0095,均P<0.01)。结论：腺苷通过抑制甲基转移酶的活性,降低RECK基因DNA启动子区域的甲基化水平,使RECK基因mRNA及蛋白表达水平增加,促使SW480细胞凋亡。 关键词：结直肠肿瘤; RECK基因; 腺苷; 甲基转移酶; 细胞凋亡; 导师：王亚旭; 分类号：R735.34 文内图片： 图３腺苦干预ＳＶＶ４８０细胞后蛋白表达情况Ｆｉｇ．３ＴｈｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＳＷ４８０ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｉｎｔｅｒｖｅｎｅｄｂｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ２．４腺昔对各组细胞调ｔ的影响流式细胞仪检测各组细胞调ｔ率显示（ 图４），３．０ｍｍｏｌ／Ｌ组干预ＳＷ４８０细胞 图３腺苦干预ＳＶＶ４８０细胞后蛋白表达情况Ｆｉｇ．３ＴｈｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＳＷ４８０ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｉｎｔｅｒｖｅｎｅｄｂｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ２．４腺昔对各组细胞调ｔ的影响流式细胞仪检测各组细胞调ｔ率显示（ 图４），３．０ｍｍｏｌ
分类号：R735.34
文内图片： 图３腺苦干预ＳＶＶ４８０细胞后蛋白表达情况Ｆｉｇ．３ＴｈｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＳＷ４８０ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｉｎｔｅｒｖｅｎｅｄｂｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ２．４腺昔对各组细胞调ｔ的影响流式细胞仪检测各组细胞调ｔ率显示（ 图４），３．０ｍｍｏｌ／Ｌ组干预ＳＷ４８０细胞 图３腺苦干预ＳＶＶ４８０细胞后蛋白表达情况Ｆｉｇ．３ＴｈｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＳＷ４８０ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｉｎｔｅｒｖｅｎｅｄｂｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ２．４腺昔对各组细胞调ｔ的影响流式细胞仪检测各组细胞调ｔ率显示（ 图４），３．０ｍｍｏｌ
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图４），３．０ｍｍｏｌ／Ｌ组干预ＳＷ４８０细胞
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