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产品资料

MET-5A细胞

MET-5A细胞
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:MET-5A细胞
  • 产品型号:
  • 产品展商:原代细胞/细胞系
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简单介绍
MET-5A细胞特性 1)来源:间皮 2)形态:上皮细胞样,贴壁生长 3)含量:>1x106 个/mL 4)污染:支原体、**、酵母和**检测为阴性 5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
产品描述

MET-5A细胞


人膜间皮细胞

货号:MET-5A

规格: 1*10 6  


MET-5A细胞细胞特性

1)来源:间皮

2)形态:上皮细胞样,贴壁生长

3)含量:>1x106 个/mL

4)污染:支原体、**、酵母和**检测为阴性

5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装


MET-5A细胞细胞接受后的处理:

1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。

2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。

4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。

5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。


MET-5A细胞细胞用途:仅供科研使用。

                     

本公司的细胞培养操作规程,供参考

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备Medium 199培养基(添加NaHCO3 1.5g/L, 3.3 nM EGF,400 nM 氢化可的松,870 nM 牛胰岛素,20 mM HEPES,3.87 µg/L H2SeO3),90%;上等胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。**天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。

3.轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。

4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行,*后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心,用血清重悬浮,加DMSO至*终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。


MET-5A细胞注意事项:

1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物**台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要**后方能丢弃。








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