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产品资料

MHCC-97H细胞

MHCC-97H细胞
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:MHCC-97H细胞
  • 产品型号:
  • 产品展商:原代细胞/细胞系
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简单介绍
MHCC-97H细胞用的培养基如有相同切记不可共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。 MHCC-97H细胞(注:实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。)
产品描述

MHCC-97H细胞

人高转移性肝癌细胞

货号:MHCC-97H

规格: 1*10 6  

细胞介绍

来源于中山医院,用人肝癌细胞株MHCC97-H接种裸鼠,进行3次肺转移筛选,取肺转移瘤建成皮下接种后高度自发性肺转移的肝癌细胞系。


MHCC-97H细胞细胞特性

1)来源:肝癌

2)形态:上皮细胞样

3)含量:>1x106 个/mL

4)污染:支原体、**、酵母和**检测为阴性

5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装


运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途:仅供科研使用。

                     

MHCC-97H细胞细胞培养步骤

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备DMEM培养基(DMEM,GIBCO,货号11965-092);北美胎牛血清(United States,GIBCO,货号16000-044),10%;双抗1%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二.MHCC-97H细胞细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。**天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

下面T25瓶为例;

   1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

   2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至*终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

   3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。






MHCC-97H细胞注意事项:

1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物**台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要**后方能丢弃。








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