U937细胞
人组织细胞**瘤细胞
货号:U937
规格: 1*10 6
细胞介绍
该细胞是由Nilsson K实验室于1974年从一名37岁的患有恶性组织细胞性**瘤的白人男性的胸水中分离建立的。1979年来的研究显示该细胞在人混合**细胞培养物上清、佛波酯、Vit D3、γ-IFN、TNF和维A酸的诱导下可以向终末单核细胞分化。该细胞不合成**球蛋白,EBV阴性;可产生溶菌酶、β-2-微球蛋白,受PMA刺激后可产生TNF-α;表达C3R;可作转染宿主;表达Fas,对TNF和抗Fas的抗体敏感。
U937细胞细胞特性
1)来源:**瘤
2)形态:单核细胞,悬浮生长
3)含量:>1x106 个/mL
4)污染:支原体、**、酵母和**检测为阴性
5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:使用T25瓶充液发送活细胞。收到细胞后,请先在显微镜下检查细胞生长状态,并将T25瓶置于培养箱约6h或过夜后,再次检查细胞状态。若状态良好,可按照以下细胞培养步骤进行细胞后续处理操作。若发现可疑污染物,请及时与我们取得联系。
细胞用途:仅供科研使用。
U937细胞细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;上等胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.U937细胞细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。**天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
U937细胞注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物**台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要**后方能丢弃。