EL-4细胞
小鼠**瘤细胞
货号:EL-4
规格: 1*10 6
细胞介绍
EL4是从用9,10-二甲基-1,2-苯并蒽在C57BL小鼠中诱导的**瘤中建立的。能抗0.1 mM 氢化可的松,对20 mcg/ml PHA敏感。 还有一个亚株(EL4.IL-2, ATCC TIB-181)可以生成高水平的IL-2。检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。
EL-4细胞细胞特性
1) 来源:T **细胞;**瘤
2) 形态:**母细胞
3) 含量:>1x106 个/mL
4) 污染:支原体、**、酵母和**检测为阴性
5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:使用含有上等胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T25培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
EL-4细胞细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备DMEM培养基(GIBCO,货号12800017,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;马血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.EL-4细胞细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。**天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
EL-4细胞注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物**台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要**后方能丢弃。