CHO细胞
仓鼠卵巢细胞
货号:CHO
规格: 1*10 6
细胞介绍
1957年从成年仓鼠的活组织切片中建立。
CHO细胞细胞特性
1)来源:仓鼠卵巢
2)形态:成纤维细胞样
3)含量:>1x106个/mL
4)污染:支原体、**、酵母和**检测为阴性
5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
细胞接受后的处理:
1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。
4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
细胞用途:仅供科研使用。
CHO细胞细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)DMEM培养基(GIBCO,货号12800017,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;上等胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.CHO细胞细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。**天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。
CHO细胞注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物**台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要**后方能丢弃。