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胎牛血清使用过程重要方法
胎牛血清为细胞生长提供必要的营养物质。胎牛血清（FBS）是zui广泛使用的细胞培养基生长补剂，因其含有大量的胚胎生长促进因子。它在使用过程的注意事项：1、注意避免沉淀加入培养液添加胎牛血清的时候要注意避免把沉淀加入培养液，因为如果培养液有沉淀的存在，会使得其中培养的细胞产生大量的黑点，除此之外，细胞的表面还很可能会覆盖一层油状物质，总之出现这样的情况会极其不利于细胞的正常生长。那么为了zui大程度
发布时间：2022-11-08 13:18
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核酸检测试剂盒实验注意事项
核酸检测试剂盒实验注意事项：①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。②使用干净的塑料容器配置洗涤液。③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。⑥使
发布时间：2022-11-03 10:21
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ELISA实验的洗涤次数
影响洗涤效果的主要参数是洗涤循环的量。当然，洗涤次数越多，背景越低。然而，太多次的洗涤会降低信号强度，使其难以测定。通常的做法是在每次抗体或抗原孵育后重复洗涤三次。不过，ELISA板的**商会对洗涤次数提出建议。一般而言，**商包被平板需要的洗涤次数比用户包被的平板要少。对于用户包被的ELISA板，必须优化洗涤次数。控制洗涤量和洗涤次数的另一种方法是加入过量的洗涤液。一般来说，96孔板的每个孔能容
发布时间：2022-10-27 11:02
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ELISA试验中比色着重关注两个方面
ELISA的比色测定由酶标仪进行，有的同行可能会认为，既然由酶标仪进行，那么此时便可以万事大吉了，其实不然，因为当代较为先进的酶标仪器仪表，均有较多的功能，使用不当，会得到令人难以理解的结果。如使用酶标仪比色测定后，有许多阴性测定孔的吸光度值为负数或测定假阳性率大大增加等等。这主要是没有正确地理解和使用酶标仪所致。至于如何正确理解和使用酶标仪详见后面有关章节。此处，只是强调下面两点：1、比色
发布时间：2022-10-20 16:31
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冻存细胞其操作步骤
原代分离细胞培养是指从供体内取出组织后，经机械以及消化分离成单个细胞或单一型细胞群，使之在体外模拟人体生理环境，在无菌、适当温度和一定的营养条件下，生存、生长和繁殖。原代培养细胞常有不同的细胞成分，生长缓慢，但是更能代表所来源的组织细胞类型和表达组织的特异性特征。利用原代细胞培养做各种实验，如药wu测试、细胞分化及病毒学方面的试验效果很好。冻存细胞其操作步骤如下：1、选对数增生期细胞(证明无支原体
发布时间：2022-10-11 15:40
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血清的主要成分及存在的问题
血清的主要成分:血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激su、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展，但仍存在一些问题。主要是：1、血清的成份可能有几
发布时间：2022-09-28 13:16
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提高 RT-PCR 反应的灵敏度与特异性方法
提高RT-PCR反应的灵敏度与特异性方法：①确定模板RNA 完整性好，无DNA 污染。② RNA模板中不应含有扩增反应抑制剂。③ 使用适量的模板RNA ，模板量太多会降低特异性，太少会导致扩增不出条带或条带太弱。④ 若模板中有二级结构，可通过提高逆转录反应温度来提高扩增效果。
发布时间：2022-09-16 16:58
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ELISA 实验中血浆的采集处理
ELISA实验中血浆的采集处理:1、真空采血针采集2ml新鲜血液，加入无菌试管中；2、按1:9加入抗凝剂（EDTA、草酸钠、肝素、枸橼酸钠），30分钟内于冰上分离血浆以减少血小板的污染；（也可以直接用抗凝管采集）；3、将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心5min，，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉淀。4、取上清。分装冻存备用，2-8℃下，可放置保存24-48小时；-20℃下，可放置保存1个月；
发布时间：2022-09-02 11:39
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质粒的提取 (Tiangen质粒提取试剂盒)过程
质粒的提取(Tiangen质粒提取试剂盒)过程：1、挑菌：选取培养板中大小中等的单个菌落，消du牙签接种到10ml摇菌管中，其中含有卡那-霉素的LB约5ml，37°C，220rpm恒温摇床中震荡培养过夜。 2、取上述2.0ml培养液，于常温下12000rpm离心1分钟，弃上清，干燥沉淀。3、加入250ul溶液P1(配有去RNA酶，4°C保存)，涡旋振荡，完全悬浮xi菌，不能留有沉淀，否则会影响裂
发布时间：2022-08-24 13:15
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操作对ELISA法手工测定的影响小结
操作对ELISA法手工测定的影响小结：1、检测前先将试剂盒从冰箱取出置室温平衡20min后使用，试剂用完及时放回冰箱冷藏，以免造成试验结果假性降低。2、加样时注意勿触及包被板底部，以免擦伤包被物使抗体（抗原）脱落而影响实验结果的准确性。3、洗涤不充分，会使结果假性增高，过分洗涤呈假阴性。4、比色时应保持包被孔底部无异物、无水汽，特别是冬季板从37℃水浴箱取出时，底部留有水汽，应将板底擦干后进行比色
发布时间：2022-08-19 13:54
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抗体的鉴定
抗体的鉴定：1、抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于zhi疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免yi吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。2、抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体
发布时间：2022-08-17 10:43
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PCR引物合成过程
目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种,主要都是由ABI/PE公司生产，而Bioneer自行研制的砖利384并行高通量DNA合成仪，可实现99%的高合成率。无论采用什么机器合成，合成的原理都相同，主要差别在于合成产率的高低，试剂消耗量的不同和单个循环用时的多少。亚磷酰胺三酯法合成DNA片段，具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在
发布时间：2022-08-10 16:00
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引物对反转录实验的影响
引物对反转录实验的影响：1、Oligo(dT)Oligo(dT)引物是约12-18个多聚胸腺嘧啶T组成的重复寡核苷酸序列，能够特异性地与真核生物mRNA的ploy(A)尾退火，故不适合缺少ploy(A)尾结构的RNA，如原核生物RNA或microRNA，也不适用于已降解的RNA，如FFPE样品中RNA。真核生物中mRNA仅占总RNA的1%-5%左右，通常在进行从真核生物中构建cDNA文库，或者克隆
发布时间：2022-08-03 15:22
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抗体的制备流程
抗体的制备流程：1.免yi原的制备普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免yi 原。小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免yi 原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。2.免yi 动物常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。3.免yi 血清的收
发布时间：2022-07-28 10:47
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小鼠血清主要优势特点
小鼠血清主要优势特点：1.提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。2.提供激su和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激su（地塞米松）、类固醇激su（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。3.提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激su等，转铁蛋白携带铁。结合蛋
发布时间：2022-07-05 16:18
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