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操作对ELISA法手工测定的影响小结
操作对ELISA法手工测定的影响小结:1、检测前先将试剂盒从冰箱取出置室温平衡20min后使用,试剂用完及时放回冰箱冷藏,以免造成试验结果假性降低。2、加样时注意勿触及包被板底部,以免擦伤包被物使抗体(抗原)脱落而影响实验结果的准确性。3、洗涤不充分,会使结果假性增高,过分洗涤呈假阴性。4、比色时应保持包被孔底部无异物、无水汽,特别是冬季板从37℃水浴箱取出时,底部留有水汽,应将板底擦干后进行比色
发布时间:2022-08-19 13:54
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抗体的鉴定
抗体的鉴定:1、抗体的效价鉴定:不管是用于诊断还是用于zhi疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免yi吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。2、抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体
发布时间:2022-08-17 10:43
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PCR引物合成过程
目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种,主要都是由ABI/PE公司生产,而Bioneer自行研制的砖利384并行高通量DNA合成仪,可实现99%的高合成率。无论采用什么机器合成,合成的原理都相同,主要差别在于合成产率的高低,试剂消耗量的不同和单个循环用时的多少。亚磷酰胺三酯法合成DNA片段,具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在
发布时间:2022-08-10 16:00
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引物对反转录实验的影响
引物对反转录实验的影响:1、Oligo(dT)Oligo(dT)引物是约12-18个多聚胸腺嘧啶T组成的重复寡核苷酸序列,能够特异性地与真核生物mRNA的ploy(A)尾退火,故不适合缺少ploy(A)尾结构的RNA,如原核生物RNA或microRNA,也不适用于已降解的RNA,如FFPE样品中RNA。真核生物中mRNA仅占总RNA的1%-5%左右,通常在进行从真核生物中构建cDNA文库,或者克隆
发布时间:2022-08-03 15:22
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抗体的制备流程
抗体的制备流程:1.免yi原的制备普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免yi 原。小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免yi 原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。2.免yi 动物常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。3.免yi 血清的收
发布时间:2022-07-28 10:47
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小鼠血清主要优势特点
小鼠血清主要优势特点:1.提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。2.提供激su和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激su(地塞米松)、类固醇激su(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。3.提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激su等,转铁蛋白携带铁。结合蛋
发布时间:2022-07-05 16:18
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简述生化试剂各种级别适用范围
生化试剂的不同级别:1.荧光级:荧光HPLC级是有梯度的并且是荧光控的,特别适合于用荧光HPLC分析PAH;2.合成纯:适用于有机合成和预制的应用;3.特级纯:适用于普通实验室工作,一般情况下符合大部分药典(BP,USP,etc.)标准;4.药典级:纯度符合Pharmaco-poeia的标准,如(NF,BP,USP,PHEUR,DAB,DAC,JP,PH法郎);5.分析纯:适用于分析、研究和质量质
发布时间:2022-06-24 13:02
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四种常用抗凝剂说明
四种常用抗凝剂说明1、EDTA:其机制是通过与水相中的钙离子形成稳定的螯合物而阻止血液凝固,EDTA能影响某些酶的活性,因此检测血液样本中指标的酶活时,不推荐使用此抗凝剂。2、肝素:是血液化学成分测定中*好的抗凝剂,其抗凝机制是与抗凝酶Ⅱ一起,在低浓度能抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之间的作用,并能加强抗凝血酶Ⅲ灭活丝氨酸蛋白酶,从而阻止凝血酶形成;还有抑制凝血酶的自我催化及抑制因子X的作用。通常用肝素
发布时间:2022-06-17 14:13
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培养细胞具体过程
在无菌环境下从机体取出某种组织细胞,经过一定的处理后接入培养器血中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首ci培养称为原代培养。培养细胞操作流程:1、将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养,则直接将组织块接入培养器皿底部,几个小时后组织块可贴牢在底部,再加入培养基。如系细胞培养,一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数,按要求以一定的
发布时间:2022-06-13 15:10
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小鼠抗IVIgG抗体elisa检测试剂盒样本操作
小鼠抗IVIgG抗体elisa检测试剂盒样本操作:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒su的试管。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右 (2000-3000转/分)去除颗粒。仔细收集上清,保存
发布时间:2022-06-10 11:00
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抗凝裂解小牛血清质量标准
抗凝裂解小牛血质量标准:血清质量高低取决于两方面因素:一是取材对象,二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内,取材过程应严格按照操作规程执行,制备出的血清要经过严格的质量鉴定。1.牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。2.有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。3.证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。4.血清要通过
发布时间:2022-05-25 15:29
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PCR反应扩增产物出现多条带原因
PCR反应扩增产物出现多条带原因:(1)引物用量偏大,引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。(2)循环的次数过多。适当增加模板的量,减少循环次数。(3)酶的用量偏高或酶的质量不好,应降低酶量或调换另一来源的酶。(4)退火温度偏低,退火及延伸时间偏长。应提高退火温度,减少变性与延伸时间,也可采用二种温度的PCR扩增。以2度为梯度设计梯度PCR反应优化退火温度。(5)样品处理不当。(6)Mg
发布时间:2022-05-16 16:24
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小鼠维生素B6 elisa检测试剂盒操作要点
小鼠维生素B6elisa检测试剂盒操作要点:1、标本的采取和保存:可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本;2、试剂的准备:所需试剂、蒸馏水、去离子水、自配的缓冲液;3、加样:一般有3次加样步聚
发布时间:2022-05-11 10:40
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细胞培养的优点
细胞培养的优点:1.研究的对象是活细胞在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。2.研究条件可以人为控制pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。3.研究的样本可以达到比较均一性
发布时间:2022-05-06 14:10
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血清不稳定原因
1、来源不稳定。以胎牛血清为例,怀孕母牛在屠宰前腹部被剖开,取出胎牛,在低温无菌条件下,刺破胎牛的心脏以获取血清。就这一条,动物伦理组织就可以把你拦住唠唠。另外,牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家,我国在对牛血清的质量《中国生物制品主要原辅料质控标准2000》中提出比较严格的标准要求,包括蛋白质含量,xi菌、真jun、支原体、牛病毒、大肠杆菌噬菌体、xi菌内毒su,细胞增殖支持等检
发布时间:2022-04-18 16:25
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