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总结血清的几个主要作用
总结血清的几个主要作用:1、提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。2、提供ji素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质ji 素(氢化可的松、地塞米松)、类固醇ji 素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。
发布时间:2022-10-25 10:38
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PCR反应出现非特异性扩增原因及对策
PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带。1、引物与靶序列不完全互补或引物聚合形成二聚体。2、Mg2+离子浓度过高。3、退火温度过低。4、PCR循环次数过多有关。5、酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现,酶量过多有时也会出现非特异性扩增。其对策有:必要时重新设计引物。减低酶量或调换另一来源的酶。降低引物量,适当增加模
发布时间:2022-10-19 10:29
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转基因植物PCR检测试剂盒实验步骤
转基因植物PCR检测试剂盒实验步骤:1.产品仅用于科研取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。2.两相分离每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是
发布时间:2022-10-08 13:59
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影响PCR特异性的因素分析
有许多因素可以影响PCR的特异性,在此我们作一归纳,供大家参考:1、退火步骤的严格性:提高退火温度可以减少不匹配的杂交,从而提高特异性。2、减短退火时间及延伸时间可以减少错误引发及错误延伸。3、引物二聚体是常见的副产品,降低引物及酶的浓度也可以减少错误引发,尤其是引物的二聚化。4、改变MgCl2(有时KCl)浓度可以改进特异性,这可能是提高反应严格性或者对Taq酶的直接作用。5、模板中如果存在次级
发布时间:2022-09-26 16:08
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钙粘附蛋白-11抗体的制备过程
钙粘附蛋白-11抗体的制备过程:1.免yi原的制备普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免yi原。小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免yi原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。2.免yi动物常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。3.免yi
发布时间:2022-09-21 10:53
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有关细胞培养
细胞培养方法:1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4
发布时间:2022-09-13 16:25
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微生物接种、分离及培养
微生物接种、分离及培养: 1、微生物接种:指将微生物纯种或含菌材料转移到另一营养基质上的过程。根据不同的目的可以采用不同的接种方法,如平板划线法,涂布法,倾注法等。2、微生物分离:指依据微生物的特征,采用各种方法从含菌样品中获得由单一个体(如单一菌体或孢子)或一段菌丝生长繁殖形成的微生物群体的过程。常用的分离方法有平板划线法,稀释涂布法,平板分离法,稀释倾注平板分离法和单细胞分离法。平板分离法的基
发布时间:2022-09-06 11:32
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选择ELISA试剂盒参考要素
选择ELISA试剂盒参考要素:1、特异性:ELISA试剂盒的特异性于试剂盒的关键组分,抗体对有关,若抗体对中之一为多抗,另一个必须为单抗,建议使用双单抗。2、灵敏度:灵敏度反映的是试剂盒检出被检物质的低量的能力,用户可根据自己样本中待检指标的量选择合适的试剂盒,如果待检指标量很低,一般的试剂盒不能满足要求,可选择高敏的ELISA试剂盒。3、重复性:科学实验讲求重复性,一般ELISA试剂盒,期板内和
发布时间:2022-08-29 14:16
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荧光化学物质原理介绍
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种:荧光探针和荧光染料。现将其原理介绍如下:1.TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可
发布时间:2022-08-22 16:43
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详述血清和血浆的区别
血清和血浆的区别在于是不是含有纤维蛋白原,这是主要的区别。离开血管的全血经抗凝处理后,通过离心沉淀,所获得的不含细胞成分的液体,即血浆。而离体的血液凝固之后,经血凝块聚缩释出的液体,即血清。粗略的说,血清与血浆的区别,主要在于血清不含纤维蛋白原,纤维蛋白原能转换成纤维蛋白,具有凝血作用在临床应用中,血浆一般是大面积shao伤的病人使用,而血清可以用来检验血型。具体区别:血清:血液凝固析出的淡黄色透
发布时间:2022-08-15 15:45
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ELISA实验细胞提取液样本反复冻融方法
ELISA实验细胞提取液样本反复冻融方法:1、吸出培养板中的培养基,用胰蛋白酶消化细胞,然后加入适量的培养基将培养板上的细胞冲洗干净。悬浮细胞可以省略该步骤。2、将细胞悬浮液收集到离心管中,在2-8℃下以1000×g离心5分钟,然后吸去培养基,用预冷PBS洗涤细胞3次。3、加入适量的预冷PBS(建议在使用前立即加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。在6孔培养板(约1×106个细胞)中,每个孔加入150-25
发布时间:2022-08-02 09:54
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xi 胞培养技巧
xi胞培养技巧:1.买细胞要去靠谱的地方买,比如ATCC或者素冉生物。一般上面会有针对细胞的介绍,这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。2.不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第2天*更换一次培养基。3.发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。xi菌污染、真jun污染很容易发现,支原体
发布时间:2022-07-26 11:55
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实时荧光定量PCR的十大不利操作说明
实时荧光定量PCR的十大不利操作说明1、引物和探针设计不当为了*高效地设计用于实时荧光定量PCR的引物和探针,我们强烈建议您使用引物设计软件。大多数引物设计程序均包含了可调节的参数以设计*佳的引物和探针。这些参数涉及了引物/探针的Tm值、互补性、二级结构以及扩增子大小等重要因素。另外还建议您限制连续的重复核酸数目。当设计用于真核目标序列的扩增子时,请选择在目标mRNA中至少跨越一个外显子-外显子接
发布时间:2022-07-06 11:43
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PCR反应被污染种类
PCR反应的*大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。PCR反应被污染种类:一、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。二、PCR试剂
发布时间:2022-07-01 13:06
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PCR产物量过少处理办法
PCR产物量过少处理办法:1、退火温度不合适。以2度为梯度设计梯度PCR反应优化退火温度。2、DNA模板量太少。增加DNA模板量。3、PCR循环数不足。增加反应循环数。4、引物量不足。增加体系中引物含量。5、延伸时间太短。以1kb/min的原则设置延伸时间。6、变性时间过长。变性时间过长会导致DNA聚合酶失活。DNA模板中存在抑制剂。确保DNA模板干净。
发布时间:2022-06-28 16:17
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