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  • 细胞适应无血清培养基的方法 细胞适应无血清培养基的方法: 1.直接适应——细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基(SFM)中。 一些类型细胞可直接从包含血清的培养基适应无血清培养基。对于直接适应,接种细胞密度应该:2.5×105~3.5×105细胞/ml。当细胞密度达到1×106~3×106细胞/ml时,传代培养细胞。当细胞密度在培养4到7天后达到2×106~4×106细胞/ml时,细胞wan全适应了无血清培养基
    发布时间:2024-07-29 16:58 点击次数:97 次
  • ELISA试验温育的时间及温度选择 在ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加酶结合物和显色剂后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育。温育的时间选择:温育这一步是ELISA测定中容易出现问题的步骤。目前国内ELISA试剂盒的反应温育时间为37℃30分钟-1小时,进口ELISA试剂盒则通常为37℃1-2小时才能有较完全的结合,低于1小时,可能会影响测定下限。ELISA
    发布时间:2024-07-22 16:46 点击次数:98 次
  • PCR产物纯化效率提升方法 PCR扩增完成后需要进行琼脂糖凝胶电泳检测,在条带单一无其他杂带的情况下,可以直接对产物进行纯化。提升PCR产物纯化效率提升方法如下:1.模板纯度,有较多蛋白或其他杂质时,会一定程度影响pcr效率;2.模板量,过高的模板量反而会降低pcr效率特异性;3.引物,引物的长度xu要再效率和特异性间获得优化,其次要控制引物gc含量;4.聚合酶,要考虑酶的保真率和速度;5.mg离子浓度,mg离子浓度过高会降
    发布时间:2024-07-18 14:54 点击次数:96 次
  • 细胞培养实验基本操作步骤 细胞培养实验基本操作步骤:1、进无菌室前要洗手,按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。2、操作者动作要轻,安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意,金属器械不能在火焰中长时间烧灼,以防退火;烧过的器械要冷却后才能使用;已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼,因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质,吸管再用时会将其带到培养液中;
    发布时间:2024-07-09 14:19 点击次数:95 次
  • 碱性磷酸酶(AKP/ALP)试剂盒操作步骤 碱性磷酸酶(AKP/ALP)试剂盒操作步骤:1.样品的准备:a.细胞样品的准备:收集细胞,用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4℃或冰浴匀浆(可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器)。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。
    发布时间:2024-07-02 10:17 点击次数:174 次
  • 标准品的稳定性与保存 为保证检测的连续可比性,每批标准品应有相当大的量,以保证能在较长时间内使用。因此,每批标准品应在适当的条件下保存,使其**活性和浓度保持稳定。1、影响标准品稳定的因素(1)基质中的酶、**污染、pH的变化、氧化、潮湿等因素都可以导致标准品的变性,而且这些变化可因高温和光照加速。(2)在保存过程中发生聚合反应等分子结构的变化,可使标准品失活。(3)容器内壁的吸附作用和溶剂的蒸发可造成标准品浓
    发布时间:2024-06-25 11:08 点击次数:83 次
  • RM细胞培养的优势特点 细胞培养是指将细胞从动物或植物体内取出,然后在适宜的人工环境中生长的过程。细胞可以在培养前直接从组织中取出并通过酶或机械方法进行解离,也可以来源于已建立的细胞系或细胞株。RM细胞培养的优势特点有以下几点:1.研究的对象是活细胞在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。2.研究条件可以人为控制pH、温度、
    发布时间:2024-06-18 14:43 点击次数:88 次
  • 抗体的五种亚型结构概述 在人体内,抗体可以分为IgG、IgM、IgA、IgD和IgE五种亚型,这五种抗体的基本结构类型相似,都是由4条多肽链构成,相互之间主要的差异点是重链(因此本小结也是对抗体Fc片段结构的描写)的结构不同,五种抗体亚型的重链对应的分别为γ、μ、α、δ和ε链。IgGIgG是人体内主要的抗体类型,也是目前在功能和结构上,被为广泛了解的类型。IgG的轻链存在两种形式:kappa(k)和lambda(λ).在
    发布时间:2024-06-05 13:20 点击次数:97 次
  • 紧密着色霉PCR检测试剂盒实验步骤 紧密着色霉PCR检测试剂盒实验步骤:1、产品仅用于科研取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。2、两相分离每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是
    发布时间:2024-05-28 10:41 点击次数:61 次
  • 原代细胞培养过程 原代细胞是从生物体内直接分离并在体外培养的细胞。它们保持了从其来源组织或器官中获取的特异性和生物学真实性。原代细胞通常具有有限的寿命,因为它们在培养中会逐渐老化并终死亡。原代细胞的培养条件:一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;3、培养基可用Eagle(MEMCorning10-010-C
    发布时间:2024-05-20 11:12 点击次数:90 次
  • 防止PCR反应污染的方法 防止PCR反应污染的方法:1、合理分隔实验室:将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行,特别注意样本处理及PCR产物的鉴定应与其它步骤严格分开。好能划分①标本处理区;②PCR反应液制备区;③PCR循环扩增区;④PCR产物鉴定区。其实验用品及吸样枪应专用,实验前应将实验室用紫外线**以破坏残留的DNA或RNA。2、吸样枪:吸样枪污染是一个值得注意的问题。由
    发布时间:2024-05-13 10:59 点击次数:123 次
  • PCR检测试剂盒引物原则 PCR反应产物的特异性由一对上下游引物所决定。引物的好坏往往是PCR成败的关键。引物设计和选择目的DNA序列区域时可遵循下列原则:1、引物长度约为16-30bp,太短会降低退火温度影响引物与模板配对,从而使非特异性增高。太长则比较浪费,且难以合成。2、引物中G+C含量通常为40%-60%,可按下式粗略估计引物的解链温度Tm=4(G+C)+2(A+T)。3、四种碱基应随机分布,在3'端不存在连续3个
    发布时间:2024-05-06 11:02 点击次数:65 次
  • 抗体的主要功能 抗体是一种被**系统用来鉴别与中和外来物质如**、病毒等的大型Y形蛋白质,是一种**球蛋白。它的产生是由于抗原侵入人体后引起各种**细胞相互作用,使**细胞中的B细胞增殖分化而形成浆细胞(效应B细胞),浆细胞可产生分泌抗体。抗体的主要功能:(1)、抗体能抑制病原体的生长繁殖,比如抗病菌的抗体就使入侵的病菌发生凝集,不让病菌吸取营养,饥饿的病菌就不能繁殖了。(2)、抗体能阻止病毒或病菌靠近人体细胞,
    发布时间:2024-04-23 16:17 点击次数:86 次
  • 小鼠ELISA试剂盒离心方法简介 小鼠ELISA试剂盒离心方法简介一、差速离心法它利用不同的粒子在离心力场中沉降的差别,在同一离心条件下,沉降速度不同,通过不断增加相对离心力,使一个非均匀混合液内的大小、形状不同的粒子分部沉淀。操作过程中一般是在离心后用倾倒的办法把上清液与沉淀分开,然后将上清液加高转速离心,分离出第2部分沉淀,如此往复加高转速,逐级分离出所需要的物质差速离心的分辨率不高,沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分
    发布时间:2024-04-15 11:59 点击次数:93 次
  • ELISA试剂盒实验液体样本处理 ELISA试剂盒实验液体样本处理:ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。1、血清室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
    发布时间:2024-04-08 15:09 点击次数:76 次
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