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从外观和性能上筛选血清分析
在实际筛选时，主要从血清外观和实验操作时细胞的生长状态进行。从外观上：1.颜色：根据血红蛋白含量的不同，胎牛血清可表现出黄色或红色，这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度。胎牛血清或多或少总有点溶血，因为胎牛血清凝血功能差，红细胞容易破裂；2.澄清度：高质量的胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低，表现为稀薄、清淡；3.血清沉淀：血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生，对血清质量没有影响，沉淀的
发布时间：2024-09-23 10:23
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生化试剂的技术分类陈述
生化试剂的技术分类:1.生化分离与分析技术光谱技术已从单一的比色法发展为采用分光光度法、透射比浊法、原子吸收和火焰发射光谱法、分子荧光光谱法。分离技术除了一般的离心和超离心技术外，还有层析技术和电泳技术。层析技术包括薄层层析、凝胶层析、离心交换层析、亲和层析、气相层析、高效液相色谱（HPLC）等等。电泳技术中纸电泳、醋酸纤维膜电泳的应用已明显减少，琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAG）应用增多，
发布时间：2024-09-14 15:18
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ELISA试剂盒主要操作步骤技巧
ELISA试剂盒主要操作步骤技巧：1加样：①实验样本过多时，可分批次操作，以减少实验时间延长造成的误差；②加酶试剂后，用吸水纸吸干孔外试剂；③作定量试验时，使用加样器加注试剂，并经常校正其准确性，此外，要做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。2.温育：①如有两种温度，尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件；②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察；③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度
发布时间：2024-09-09 10:03
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小鼠血管舒缓激肽（BK）ELISA试剂盒实验包被和封闭的原理
ELISA包被和封闭的原理：实验时，需要将抗原或捕获抗体包被于固相载体上，通过检测分子（酶或荧光基团），将化学信号转换为电信号，以OD值或发光值的结果，对靶蛋白进行定量分析。ELISA中的固相载体物很多，常用的是聚苯乙烯，具有较强的蛋白质吸附性。具有可制成各种形式，且不参与化学反应的特点。与聚苯乙烯类似的塑料为聚氯乙烯，它质软板薄，可切割，价廉、但光洁度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比
发布时间：2024-09-03 11:02
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大肠杆菌PCR检测试剂盒PCR引物二聚体减除方法
大肠杆菌PCR检测试剂盒PCR引物二聚体减除方法：如果出现了引物二聚体，有许多方法可以减少或消除反应中的引物二聚体。1、首先是优化热循环条件，这主要是提高退火温度。大多数情况下，两步循环(由95°C变性步骤直接进入60°C退火和延伸步骤)有利于强效扩增，因此引物设计时设定的成功退火温度为60°C。2、可降低引物浓度，甚至采用不同的正向引物和反向引物的比值也有一定的帮助。大多数情况下，每条引物的理想
发布时间：2024-08-27 10:24
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鉴定ELISA试剂盒方法分析
鉴定ELISA试剂盒方法：鉴别方法：Ⅰ：利用干扰实验即可辨别elisa试剂盒是否检测目的抗原，方法如下：（1）将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody:antigen≈1:2的混合孵育液（2）37℃孵育15分钟后，代替原试剂盒中的检测抗体（3）后续操作按照试剂盒说明书进行，加检测抗体、酶复合物和底物（4）实验完毕后，检测其标准曲线，如果标准曲线良好则说明加入的目的
发布时间：2024-08-19 14:07
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PCR反应条件的选择技巧
PCR反应条件的选择技巧主要体现在温度、时间和循环次数上，温度过高，延伸时间不够都会对实验结果有很大的影响。PCR反应条件三要素为温度、时间和循环次数。温度与时间的设置基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA在90～95℃变性，再迅速冷却至40～60℃，引物退火并结合到靶序列上，然后快速升温至70～75℃，在TaqDNA 聚合酶的作用下，使引
发布时间：2024-08-16 13:43
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ELISA检测试剂盒实验加样流程
ELISA检测试剂盒实验加样流程：1、标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟;若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。2、加样后及时放入孵箱。 3、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。4、如果采用
发布时间：2024-08-13 10:38
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细胞复苏过程
细胞复苏是指将冻存在液氮里边或者-80℃冰箱中的细胞解冻，再培养传代。细胞复苏应采用快速融化的方法，这样的目的是为了让细胞外结晶在很短的时间内融化，从而避免慢悠悠的融化，使得水分渗入细胞内再结晶，从而对细胞再次造成伤害，从而影响细胞的存活率。细胞复苏：1：细胞是冻在-80℃的环境里面的，所以拿出来后，应该尽快去37℃水浴锅里解冻（我一般是放在PE手套里面，然后在37摄氏度的水域上快速融化。
发布时间：2024-08-06 10:12
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细胞适应无血清培养基的方法
细胞适应无血清培养基的方法： 1.直接适应——细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基（SFM）中。 一些类型细胞可直接从包含血清的培养基适应无血清培养基。对于直接适应，接种细胞密度应该:2.5×105~3.5×105细胞/ml。当细胞密度达到1×106~3×106细胞/ml时，传代培养细胞。当细胞密度在培养4到7天后达到2×106~4×106细胞/ml时，细胞wan全适应了无血清培养基
发布时间：2024-07-29 16:58
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ELISA试验温育的时间及温度选择
在ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加酶结合物和显色剂后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育(incubation)，有人称之为孵育。温育的时间选择：温育这一步是ELISA测定中容易出现问题的步骤。目前国内ELISA试剂盒的反应温育时间为37℃30分钟-1小时，进口ELISA试剂盒则通常为37℃1-2小时才能有较完全的结合，低于1小时，可能会影响测定下限。ELISA
发布时间：2024-07-22 16:46
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PCR产物纯化效率提升方法
PCR扩增完成后需要进行琼脂糖凝胶电泳检测，在条带单一无其他杂带的情况下，可以直接对产物进行纯化。提升PCR产物纯化效率提升方法如下：1.模板纯度，有较多蛋白或其他杂质时，会一定程度影响pcr效率；2.模板量，过高的模板量反而会降低pcr效率特异性；3.引物，引物的长度xu要再效率和特异性间获得优化，其次要控制引物gc含量；4.聚合酶，要考虑酶的保真率和速度；5.mg离子浓度，mg离子浓度过高会降
发布时间：2024-07-18 14:54
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细胞培养实验基本操作步骤
细胞培养实验基本操作步骤：1、进无菌室前要洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。2、操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；
发布时间：2024-07-09 14:19
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碱性磷酸酶(AKP/ALP)试剂盒操作步骤
碱性磷酸酶(AKP/ALP)试剂盒操作步骤:1.样品的准备：a.细胞样品的准备：收集细胞，用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4℃或冰浴匀浆(可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器)。随后匀浆液4℃离心，取上清作为待测样品。
发布时间：2024-07-02 10:17
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标准品的稳定性与保存
为保证检测的连续可比性，每批标准品应有相当大的量，以保证能在较长时间内使用。因此，每批标准品应在适当的条件下保存，使其**活性和浓度保持稳定。1、影响标准品稳定的因素（1）基质中的酶、**污染、pH的变化、氧化、潮湿等因素都可以导致标准品的变性，而且这些变化可因高温和光照加速。（2）在保存过程中发生聚合反应等分子结构的变化，可使标准品失活。（3）容器内壁的吸附作用和溶剂的蒸发可造成标准品浓
发布时间：2024-06-25 11:08
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