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细胞划痕实验注意事项
伤口**试验,也通常称为“划痕试验”,是一种广泛建立的研究体外集体细胞迁移的技术。细胞划痕(WoundHealing)是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。其实验原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”**。划痕实验需要注意事项:1.细胞的密度;划痕实验一般是几种细胞的结合,但是每种
发布时间:2024-03-05 10:42
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PCR仪特性汇总
PCR仪是通过PCR(聚合酶链式反应)技术,对特定DNA进行扩增的仪器。PCR仪就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。PCR仪特点:1、半导体技术、新一代半导体(Peltier)技术。2、方便灵活的模块更换装置,轻松更换所需模块。3、可实现远程故障判断。
发布时间:2024-02-27 14:00
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ELISA试剂盒实验操作中的原则归纳
ELISA试剂盒恢复至室温后,取出要使用的酶标板孔,未使用的酶标板孔应及时放回铝箔袋,加入干燥剂,封紧封口,冷藏保存。切忌将未完全平衡至室温的酶标板放回铝箔袋,因为此时由于温度差,酶标板上会有水汽,不利于稳定保存。ELISA试剂盒实验操作中的原则:一、随机原则:即运用“随机数字表"实现随机化;运用“随机排列表"实现随机化;运用计算机产生“伪随机数"实现随机化。尽量运用统计学知识来设计自己的
发布时间:2024-02-19 13:59
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小鼠ELISA检测试剂盒试验产生气泡解读
通常气泡都是聚集在酶标板的孔周围,导致孔中液体不能与孔壁有效接触,使孔内反应不均一。在做实验的过程中,有时为了打干净枪头里面的液体,很容易产生气泡。 1.通常气泡都是聚集在酶标板的孔周围,导致孔中液体不能与孔壁有效接触。 2.孔内反应不均一。 3.包被时有气泡的话,将导致包被不完全实际包被量下降--弱阳性甚至假阴性。 4.封闭时有气泡的话,将导致大量未结合位点的存在,引起非特异性结合-
发布时间:2024-02-04 13:17
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ELISA全自动洗板机洗涤介绍
全自动洗板机洗涤的目的是将固体支持物上形成的抗原-抗体复合物与液体中其他过量的游离反应物质分离。即洗涤去除未结合的抗原和杂质,洗涤后,固相载体上仅保留特异性抗体。其他**球蛋白和血清中的杂质在洗涤过程中被洗掉,因为它们不能与固相抗原结合。因此,全自动洗板机的功能只有洗涤功能,没有检测功能。酶标仪实际上是一个比色检测器。酶标仪一般为内置洗板机式,可清洗检测,体积大。体积小只是酶标比色检测器,使
发布时间:2024-01-16 11:05
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人皮肤成纤维细胞培养小技巧
人皮肤成纤维细胞培养小技巧:1.买细胞要去靠谱的地方买,一般上面会有针对细胞的介绍,这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。2.不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第2天更换一次培养基。3.发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。**污染、**污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢
发布时间:2024-01-10 10:40
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大鼠蛋白酶原A(PGA)elisa定量检测试剂盒夹心法操作步骤
大鼠蛋白酶原A(PGA)elisa定量检测试剂盒夹心法操作步骤:实验开始前,各试剂和样本均应平衡至室温;样本复融后需再次离心,取上清检测;试剂或样本配制时,需充分混匀并尽量避免起泡;标曲和样本建议做复孔检测。1. 加样:将标准品工作液依次加入到前两列孔中,每个浓度的工作液并列加两孔,每孔100μL。待测样品加入到其他孔,每孔100μL(若样本浓度高于检测范围,需用标准品&样本稀释液稀释后取样)。给
发布时间:2024-01-02 10:41
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硫酸酯酶2蛋白抗体实验原理
硫酸酯酶2蛋白抗体实验原理:1、特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以**病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或**的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。2、活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。3、结合细胞:不同类别的**球蛋白,可结合不
发布时间:2023-12-13 11:02
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RT-qPCR原理主要步骤
RT-qPCR原理的三个主要步骤:1、反转录:1)、使用逆转录酶和特定引物将RNA样品反转录成cDNA。2)、该步骤将RNA模板转化为更稳定且可扩增的DNA形式。3)、反转录过程中使用特定引物。2PCR扩增:1)、使用特定引物对cDNA进行PCR扩增,这些引物环绕目标区域。2)、PCR是一个循环过程,呈指数级扩增DNA模板的数量。3)、PCR反应中包含荧光染料或探针,它们结合到扩增的DNA序列上并
发布时间:2023-12-05 10:56
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ELISA各项实验条件的选择指南
在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:1、固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。2、包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在
发布时间:2023-11-30 10:49
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Elisa试剂盒标曲R值合格标准
Elisa试剂盒标曲R值合格标准: 实验室应按检测标准(方法)的要求使用标准溶液或标准物质建立标准曲线。所用标准溶液或标准物质应覆盖被测样品的浓度范围。检测标准(方法)如无具体的要求,至少使用5个标样(除空白外)建立线性标准曲线,每个点重复测定1-3次,对于筛选方法,线性回归方程的相关系数不应低于0.98,对于确证方法,相关系数不应低于0.99。 其实,大于0.99是判断是否为线性相关的一
发布时间:2023-11-21 14:49
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大鼠角膜上皮细胞基本特性功能
1、功能:(1)、血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。(2)、表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。(3)、与血管**的进展和稳定有关。2、生理变化:(1)、主动脉硬化。(2)、主动脉瘤(3)、主动脉钙化。3、基本特性:(1)、组织来源于正常大鼠大动脉组织。(2)、鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin**荧光染色。(3)、原代细胞培养末期液氮冻存。
发布时间:2023-11-17 14:19
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原代细胞培养与传代细胞培养区别归纳
区别一:定义不同原代细胞培养:原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的**培养,也叫初代培养。传代细胞培养:传代培养是指需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养的过程。对单层培养而言,80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段。区别二:特点不同原代细胞培养:与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大。由于培养的细胞刚刚从活体组织分离出来,故更接近于生物体内的生活状态。
发布时间:2023-11-07 11:35
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PCR反应污染原因与对策
PCR反应的特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。污染原因:1、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。2、PCR试剂的污染:主要
发布时间:2023-10-18 16:33
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HGF小鼠肝细胞生长因子ELISA试剂盒试验绘制标准曲线注意点
HGF小鼠肝细胞生长因子ELISA试剂盒试验绘制标准曲线注意点:1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度
发布时间:2023-10-13 15:14
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