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免yi 荧光技术测定
免yi荧光测定,是抗原抗体反应后,利用特殊仪器测定荧光强度而推算被测物浓度的检测方法一、荧光物质荧光色素许多物质都可产生荧光现象,但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免yi荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有:⑴异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)为黄色或橙黄色结晶粉末,易溶于水或酒精等溶剂。分子量为389.
发布时间:2021-09-26 15:21
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决定ELISA试剂盒检测结果的三个条件
决定ELISA试剂盒检测结果的三个条件,下面就让我们来具体看看是哪些吧!一、ELISA加样步骤在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下倒置混和,不要在混匀器上强烈振荡。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清天然凝固、血kuai收缩后即可取得。也可在板孔中加入稀释液,再在其加入血清标本,然后
发布时间:2021-09-16 11:30
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保藏菌种几种常用方法
菌种保藏方法大致可分为以下几种:1.传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧xi菌用),培养后于4—6℃冰箱内保存。2.液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭jun的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。3.载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤
发布时间:2021-09-08 10:45
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有关ELISA实验显色、比色与酶标比色仪
(1)显色显色是ELISA中的*后一步温育反应,此时酶催化无色的底物**有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色可在室温进行,时间一般不需要严格控制,有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色适当缩短或延长反应时间,及时判断。
发布时间:2021-09-03 11:03
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荧光PCR试剂盒反应要素介绍
PCR反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:①引物长度:15-30bp,常用为20bp左右。②引物扩增跨度:以200-500bp为
发布时间:2021-08-25 14:35
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常见的微生物鉴定方法
微生物是对药品原料、生产环境和成品造成污染的重要因素,也是造成生产失败、成品不合格、对人类造成危害的重要因素。因此,分离得到的污染微生物,进行微生物鉴定,是十分必要的,也可为检验和生产提供有效的依据。1、形态学特征(1)细胞形态在显微镜下观察细胞外形大小、形状、排列等,细胞构造,革兰氏染色反应,能否运动、鞭毛着生部位和数目,有无芽孢和荚膜、芽孢的大小和位置,放线菌和真jun的繁殖器官的形状、构造,
发布时间:2021-08-19 13:51
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PCR工作步骤
需要自备的器材:1.方法仪器:分析天平、离心机、荧光PCR扩增仪、组织研磨器、-20℃冰箱、可调移液器(2μL、20μL、200μL、1000μL)。2.耗材:荧光PCR专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5mL经焦碳酸二乙酯(DEPC)水处理的mie菌离心管、吸头(10μL、200μL、1000μL)、mie菌双蒸水。样本采集、存放及运输:1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;2、存放
发布时间:2021-08-12 13:06
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小鼠ELISA试剂盒实验测定与注意事项
小鼠ELISA试剂盒实验测定:一、定性测定(1)阳性判定值法(cut-offvalue,CO值):一般为阴性对照的平均A值加一个常数,试剂制备严格标准化,要先计算出阳性对照A值平均数和阴性对照A值平均数。标本A值≥CO值即为阳性。(2)抑制率法:在竞争抑制法中结果可用抑制率表示。抑制率(%)=(A阴性对照A-A待测)/阴性对照X100%,一般以抑制率≥50%为阳性二、半定量测定 结果一般以滴度表示
发布时间:2021-08-03 16:20
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荧光抗体技术应用领域
荧光抗体技术,用荧光物标记抗体来检测细胞或组织中相应抗原或抗体的技术。荧光物种类一般有异硫氰酸荧光素、罗丹明荧光素、二氯三嗪基氨基荧光素等。一般是将待测标本固定于玻片表面,滴加已知荧光抗体后再以缓冲液冲洗,干燥后于荧光显微镜下观察阳性是可见带荧光的抗原抗体复合物;阴性无荧光(因为带荧光的抗体不能与抗原结合,被冲冼掉)。该技术具有简单、特异性高、敏感性低、同时检测多种抗原时较复杂等特点。 荧光
发布时间:2021-07-28 16:09
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介绍新生牛血清包括哪些主要成分
血清的成分虽然比较简单,但是还是有很多成分没有被破解,这也是一直让科研人员烦恼的一件事,并且新生牛血清的成分还受供体的一些因素所影响,例如供体的年龄和生理状况,这些都会影响血清的成分,所以研究血清成分也是一件比较复杂的工作,那么新生血清有哪些成分? 1.蛋白质新生牛血清的服务商介绍,新生牛血清中的主要成份中除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是类蛋白外,主要还有白蛋白,球蛋白。纤维粘连素细胞促进细胞
发布时间:2021-07-21 14:53
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大鼠elisa试剂盒操作步骤
大鼠elisa试剂盒操作步骤如下:1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,3. 温育:用封板膜封板后置 3
发布时间:2021-07-12 15:20
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ELISA夹心法操作步骤说明
实验开始前,各试剂和样本均应平衡至室温;样本复融后需再次离心,取上清检测;试剂或样本配制时,需充分混匀并尽量避免起泡;标曲和样本建议做复孔检测。1.加样:将标准品工作液依次加入到前两列孔中,每个浓度的工作液并列加两孔,每孔100μL。待测样品加入到其他孔,每孔100μL(若样本浓度高于检测范围,需用标准品&样本稀释液稀释后取样)。给酶标板覆膜,37℃孵育90分钟。提示:加样时将样品加于酶标板底部,
发布时间:2021-07-06 14:27
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血清灭活常出现问题解答
1、问:加到培养基中的血清必须灭活吗?答:不是必须的,看做什么实验了。2、问:四季青胎牛血清灭活是56℃30分钟吗?答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子。但是如果用于培养一些表面具有补体受体的细胞,如内皮细胞,血清是需要灭活,一般是56℃,30min。3、问:我要做滋养细胞培养,胎牛血清要灭活吗?答:进口的一般都已灭活,国产的不一定,还是灭活一
发布时间:2021-06-30 13:48
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猪elisa试剂盒试验原理与注意事项
猪elisa试剂盒试验原理:猪elisa试剂盒是固相夹心法酶联吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。注意事项:1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,
发布时间:2021-06-30 13:46
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